Лечение остеопоротических переломов является одной из актуальных проблем ортопедии, поскольку из-за уменьшения костной массы и ослабления прочности места перелома, сложности репозиции и прочной внутренней фиксации, склонности имплантации искусственных материалов к расшатыванию и разрушению, а также относительно низкого качества заживления костного рубца, частота рецидивов переломов чрезвычайно высока. Поэтому, помимо хирургического лечения, лечение остеопоротических переломов при первичном остеопорозе может помочь улучшить частоту заживления переломов. rhPTH1-34 — один из важнейших пептидных гормонов, регулирующих обмен кальция и фосфора и поддерживающих баланс кальция в организме. rhPTH1-34 обладает такой же способностью связывания с рецепторами и биологической активностью, как и цельная молекула PTH, и имеет меньше побочных эффектов, чем цельная молекула PTH. Он широко используется для изучения структуры и функции ПТГ с меньшими побочными эффектами, чем цельная молекула ПТГ. Несмотря на то, что многие исследования на животных и клинические исследования показывают, что ПТГ является новым подходом к увеличению костной массы, улучшению качества кости и лечению остеопороза, стоит изучить, можно ли использовать ПТГ для лечения остеопоротических переломов таким образом, чтобы одновременно увеличить плотность кости и улучшить биомеханические свойства кости, способствовать заживлению переломов и снизить частоту повторных переломов. I. Материалы и методы 1. Создание модели остеопоротического перелома Восемьдесят 6-месячных крыс весом 260-300 г, самки, чистые крысы SD были случайным образом разделены на группу rhPTH1-34, группу эстрогена, контрольную группу и группу мнимой операции, по 20 крыс в каждой группе. Первые три группы анестезировали внутрибрюшинной инъекцией 10% хлоралгидрата (0,3 г/кг) и подвергали двусторонней овариэктомии, а фиктивно оперированную группу подвергали воздействию без овариэктомии и разрез зашивали. После 3 месяцев выкармливания под той же анестезией была создана модель перелома, т.е. средний сегмент правой бедренной кости был отсечен с помощью проволочной пилы, а ретроградная внутренняя фиксация костномозговой полости была выполнена с помощью штифта Киршнера (диаметром 2 мм). Обе хирургические процедуры проводились в строгих асептических условиях, а послеоперационный пенициллин (2 млн мк/кг) использовался для профилактики инфекции в течение трех дней, после чего животные были выпущены в клетки для свободного передвижения и кормления. 2. Методы введения препаратов, сбор образцов и лечение С первого дня после создания экспериментальной модели перелома, rhPTH1-34 вводили подкожно в группу rhPTH1-34 три раза в неделю по 20 мкг/кг; эстрадиола бензоат вводили подкожно в группу эстрогена три раза в неделю по 0,1 мг/кг; равное количество физраствора вводили подкожно в контрольную и фиктивно оперированную группы три раза в неделю. По две крысы в каждой группе были казнены через 8 недель после внутренней фиксации перелома, и правая бедренная кость была извлечена неповрежденной, мягкие ткани были удалены, промыты физиологическим раствором, немедленно помещены в 10% раствор нейтрального формальдегида (формалина), зафиксированы в течение 24 часов, помечены в группы, и было проведено гистологическое исследование костных струпьев. После 9 недель лечения медикаментами после внутренней фиксации перелома правой бедренной кости крыс подвергали чрезмерной анестезии, удаляли правую бедренную кость и поясничный 3 позвонок, удаляли мягкие ткани, прикрепленные к кости, удаляли внутреннюю фиксацию, заворачивали в пропитанную физраствором марлю и помещали в пластиковые пакеты, маркировали по группам, хранили в холодильнике при -20°C и готовили к тесту на трехточечное сгибание и тесту на углубление поясничного 3 позвонка. Были проведены следующие измерения или обследования: Измерение BMD: 10 крыс в каждой группе были отобраны, и значения BMD 4-го и 5-го поясничных позвонков и перелома правой бедренной кости были измерены в естественных условиях до удаления яичников, через 12 недель после удаления яичников и через 9 недель после медикаментозного лечения, значения BMD 4-го и 5-го поясничных позвонков были измерены в естественных условиях с помощью костного денситометра, а правая бедренная кость была удалена неповрежденной после казни крыс, и мягкие ткани были удалены. Значения BMD были измерены в месте перелома правой бедренной кости. Рентгенографическое исследование: Рентгенограммы правого бедра были сделаны у предварительно меченых крыс через 4 и 8 недель после внутренней фиксации перелома для сравнения и наблюдения за ростом костных струпов в каждой группе. Гистопатологическое исследование костных струпьев в месте перелома: 2 крысы были казнены в каждой группе через 8 недель после внутренней фиксации перелома, и костные струпья в месте перелома были взяты для гистопатологического исследования, чтобы сравнить заживление перелома в каждой группе. Биомеханические измерения: После 9 недель лечения крыс казнили, брали правую бедренную кость и поясничные 3 позвонка, проводили испытание на трехточечный изгиб бедренной кости и испытание на вогнутость поясничного позвонка с помощью экспериментального прибора для биоматериалов MTS-858. 3, статистическая обработка: Для статистического анализа использовалось статистическое программное обеспечение SPSS11.0, результаты выражались как ± s. Односторонний ANOVA использовался для сравнения средних показателей четырех групп в один и тот же период времени, и разница была значительной при P<0,05. II. РЕЗУЛЬТАТЫ 1. Сравнительное наблюдение рентгенограмм через 4 и 8 недель после внутренней фиксации перелома показало, что в группе rhPTH1-34 через линию перелома наблюдались непрерывные костные струпья, костные струпья были обернуты вокруг линии перелома и линия перелома была нечеткой, а в группе эстрогена, контрольной группе и группе фиктивной операции в тот же период наблюдались только несколько реактивных костных струпьев, без костных струпьев, обернутых вокруг линии перелома и с четкой линией перелома. 2. Гистологическое исследование костных струпьев На 8-й неделе хрящевые костные струпья постепенно заменялись костными, среди которых костные трабекулы в группе rhPTH1-34 были толще и плотнее, выровнены по направлению напряжения, с хорошей оссификацией, а хрящевые костные струпья преобразовались в костные. В контрольной группе все еще было видно больше хрящевых костных корок, трансформация в костные корки происходила медленно, с большим количеством хондроцитов, более тонкими костными трабекулами, большими промежутками, дезорганизованной структурой и вялостью. 3. Измерение минеральной плотности костной ткани До лечения (через 3 месяца после овариэктомии) значения BMD поясничных 4 и 5 позвонков и правого бедра у крыс группы rhPTH1-34, группы эстрогена и контрольной группы были значительно ниже, чем у крыс из фиктивной группы, со значительными различиями (P<0,05), что свидетельствует о том, что у крыс OVX наблюдался значительный остеопороз через 3 месяца после двусторонней овариэктомии, что указывает на успешное моделирование (см. таблицу 1). Значения BMD правой бедренной кости в группах rhPTH1-34 и эстрогена были значительно выше, чем в контрольной группе через 9 недель после подкожного введения rhPTH1-34, со значительными различиями (P<0,05). Значения BMD правой бедренной кости в группе, подвергшейся sham-операции, были значительно выше, чем в контрольной группе, со значительной разницей (P<0,05). Значения BMD правой бедренной кости в группах rhPTH1-34, эстрогена и шам-оперированной группе существенно не отличались.