Активность NADH-MetHb редуктазы измерялась с использованием цианогенного метгемоглобина в качестве субстрата, или дихлорфенол-индофенола в качестве субстрата для определения активности фермента желтой доставки, или цитохрома b5 в качестве субстрата для определения активности b5R. Важно подчеркнуть, что результаты в пробирке (при высоких концентрациях субстрата) не точно отражают степень снижения каталитической эффективности в живых клетках (при низких концентрациях субстрата) из-за различных механизмов действия разных генетических вариантов. Это связано с тем, что если структура молекулы фермента изменена таким образом, что его сродство к субстрату NADH снижено (значение Km увеличивается), то в физиологических условиях концентрация NADH в клетке очень низкая и активность фермента почти полностью теряется; однако, когда активность фермента измеряется в пробирке, добавленный NADH эквивалентен физиологической концентрации в десятки или даже сотни раз, и активность фермента может быть измерена полностью. Если активность фермента измеряется при низких концентрациях субстрата, его мгновенная начальная скорость должна быть зарегистрирована с помощью временной развертки, иначе ошибка слишком велика. Другие наследственные заболевания, связанные с дефицитом ферментов, имеют схожие проблемы. У нормальных людей активность ферментов стабильна, а изменения в активности ферментов указывают на то, что определенные ферменты попали в кровь, мочу или жидкости организма в результате повреждения или заболевания определенных органов и тканей организма. Поэтому измерение активности ферментов в крови, моче или биологических жидкостях может быть использовано для понимания или определения начала и прогрессирования определенных заболеваний.