Для соединения сперматозоида и яйцеклетки с образованием оплодотворенной яйцеклетки необходимо пройти два барьера: барьер реакции zona pellucida и второй барьер, возникающий в результате закрытия желточной мембраны. После эякуляции во влагалище сперматозоиды проходят через полость матки в фаллопиеву трубу, где они проходят через барьер zona pellucida после встречи возбужденного сперматозоида с яйцеклеткой, который высвобождает акросомальные ферменты, растворяющие лучистый венец и zona pellucida по периферии яйцеклетки. Когда головка первого сперматозоида вступает в контакт с поверхностью яйцеклетки, она вызывает натяжение и утолщение желточной мембраны, чтобы другие сперматозоиды не могли больше проникнуть в яйцеклетку, что является вторым барьером на пути закрывающего действия желточной мембраны. Поэтому оплодотворенная яйцеклетка обычно формируется как союз одного сперматозоида и одной яйцеклетки. Весь процесс оплодотворения занимает около 24 часов.