http://blog.sina.com.cn/bb13 Исследование улучшения активности фермента акросомы сперматозоидов человека с помощью отвара Цян Цзин Бин Бин1 Ван Цзе1 Ван Куан Шэн1 Ли Гуофэн2 (1. отделение гинекологии, Первый филиал больницы Гуанси Колледжа традиционной китайской медицины, Наньнин 530023 Бин Бин, отделение гинекологии, Первый филиал больницы Гуанси Колледжа традиционной китайской медицины, Наньнин 2. отделение гинекологии, Янцзянская больница традиционной китайской медицины, Янцзян 529500, провинция Гуандун, Китай) Аннотация. Цель: изучить влияние отвара китайской травы Цян Цзин на активность фермента акросомы сперматозоидов человека. МЕТОДЫ: Шестьдесят пациентов с диагнозом низкой активности фермента акросомы и олигоспермией были разделены на две группы по 30 человек в каждой с помощью метода таблицы случайных чисел. В лечебной группе ежедневно перорально принималась одна доза отвара Цян Цзин, разделенная на утреннюю и вечернюю дозы; в контрольной группе перорально принималось по 4 капсулы 3 раза в день. Цикл лечения составил три месяца в обеих группах. В обеих группах активность акросомального фермента измерялась модифицированным методом Кеннеди до и после лечения, а динамическое качество спермы измерялось с помощью системы Weili Colour Sperm Quality Test System до, в конце 4 недели, в конце 8 недели и после лечения. Полученные данные обрабатывались с помощью статистического пакета SPSS 11.5. Результаты: 1. Как отвар Цян Цзин, так и капсулы Шэн Цзин улучшили активность фермента акросомы, плотность и жизнеспособность спермы пациентов, и разница между до и после была значительной; 2. Эффект отвара Цян Цзин в повышении жизнеспособности спермы был аналогичен эффекту капсул Шэн Цзин, и разница между двумя группами не была значительной; 3. Эффект отвара Цян Цзин в улучшении активности фермента акросомы спермы был лучше, чем у капсул Шэн Цзин, и разница между двумя группами была значительной. Вывод: китайский травяной отвар Цян Цзин, который в основном тонизирует почки и укрепляет селезенку, а также очищает тепло, снимает сырость и активизирует кровообращение для устранения застоя крови, оказывает терапевтическое воздействие на мужское бесплодие, вызванное снижением активности фермента акросомы сперматозоидов у человека. Ключевые слова: отвар крепкой спермы; мужское бесплодие; активность фермента акросомы; терапия китайской медицины Фермент акросомы сперматозоида действует как агент лизиса для zona pellucida яйцеклетки, когда сперматозоид проникает в zona pellucida, поэтому уровень его активности может непосредственно влиять на зачатие [1-3]. Тест на активность фермента акросомы является важным показателем качества живых сперматозоидов [4~5]. Основываясь на нашем многолетнем клиническом опыте, мы пришли к выводу, что «недостаточность селезенки и почек в сочетании с сыростью, жаром, застоем и токсичностью» [?] [?] Экспериментальная формула Qiang Jing Decoction [6], основанная на этой теории, эффективна для тонизации почек и укрепления селезенки, а также для оживления крови, очистки тепла и снятия сырости и т.д. Исследования показали, что эта формула обладает эффектом улучшения качества спермы, восстановления патологических повреждений яичек у модельных мышей [7] и снижения уровня апоптоза сперматогенных клеток [8]. В данном исследовании влияние отвара Цян Цзин на активность фермента акросомы сперматозоидов человека наблюдалось контролируемым образом, чтобы обеспечить основу для экспериментов на людях по применению этого вида формулы в лечении мужского бесплодия. 1 Материалы и методы 1.1 Материалы 1.1.1 Источники медицинской документации и критерии диагностики и исключения 1.1.1.1 Источники медицинской документации Все 60 случаев были получены от пациентов, посещавших мужскую амбулаторию Первой аффилированной больницы Гуансиского колледжа традиционной китайской медицины с февраля 2009 года по декабрь 2009 года. 1.1.1.2 Критерии диагностики: ① Олигозооспермия: соответствуют диагностическим критериям, рекомендованным в Руководстве ВОЗ по лабораторным исследованиям спермы человека и взаимодействия спермы с цервикальной слизью 2001 года [9]. То есть: плотность сперматозоидов <20×106/мл или общее количество сперматозоидов <40×106 как олигоспермия; быстро движущиеся вперед сперматозоиды (класс a) + медленно или вяло движущиеся вперед сперматозоиды (класс b) <50%, или класс a <25%, или класс a + класс b + не движущиеся вперед сперматозоиды (класс c) <60% в течение 60 мин после эякуляции как слабые сперматозоиды; ② гипофункция акросомы: акросома сперматозоидов. (3) Женатые мужчины в возрасте 22-45 лет с продолжительностью бесплодия 1-10 лет. 1.1.1.3 Критерии включения: трое, отвечающих диагностическим критериям. 1.1.1.4 Критерии исключения: пациенты с хромосомными аномалиями, вызывающими бесплодие; пациенты с тяжелыми инфекциями репродуктивного тракта; пациенты с нарушениями функции печени и почек и сердечно-сосудистыми нарушениями, требующими длительного медикаментозного лечения; пациенты с неврозами и психическими расстройствами; пациенты с варикоцеле II и выше; пациенты с плотностью сперматозоидов <5×106/мл. 1.1.1.5 Критерии отмены: Безопасность и соблюдение режима приема препарата должны регистрироваться на контрольных визитах раз в две недели. Отмена препарата будет зафиксирована в медицинской карте, а последний результат теста будет считаться окончательным. 1.1.2 Препараты Отвар Цян Цзин: гранулы с одной травяной формулой, произведенные фармацевтической компанией "Цзянъинь Тяньцзян" провинции Цзянсу, основной состав и дозировка (эквивалент количества таблеток для питья): Cuscuta sinensis 20 г, Fructus Lycii 20 г, Yimu Cao 30 г, крем из оленьих рогов 10 г, Astragalus membranaceus 30 г, Radix Angelicae Sinensis 10 г, Radix et Rhizoma Sequoiae 10 г, Oyster 30 г, Shen Qu 10 г и т.д. Капсула сырой эссенции: произведена фармацевтической компанией Zunyi Liao Yuanhe Tang Pharmaceutical Co, Ltd, номер партии: 20080701. Спецификация: 24 капсулы/коробка, 0,4 г/капсула. 1.2 Экспериментальный метод 1.2.1 Распределение пациентов по группам Пациенты были разделены на контрольную группу, принимающую капсулы "Шэнцзин", и лечебную группу, принимающую отвар "Цянцзин", методом таблицы случайных чисел, по 30 человек в каждой группе. 1.2.2 Метод приема и сбора образцов ① Метод приема: контрольная группа принимала капсулы спермы перорально, 4 капсулы/раз, 3 раза в день; лечебная группа принимала отвар сильной эссенции, 1 доза в день, лекарство наливали в чашку, добавляли около 200 мл горячей кипяченой воды, размешивали до растворения, если образовывался сгусток, его можно было оставить на 10 минут, а затем продолжать размешивать. Обе группы лечились непрерывно в течение 12 недель. Прием других препаратов, используемых для лечения заболевания, был прекращен за 2 недели до и во время лечения, и приостановлен в период простуды и лихорадки; если необходимо было лечить другие заболевания, использовались препараты, не влияющие на болезнь. ②Сбор образцов: сбор спермы путем мастурбации до начала лечения и в течение 3 дней в конце 4-й, 8-й и 12-й недели лечения соответственно. 1.2.3 Тестирование образцов ① Динамика спермы: тестирование проводилось с помощью системы тестирования качества спермы Weili Colour Sperm Testing System (WLJY-9000). ② Активность фермента акросомы сперматозоида: тестирование проводилось модифицированным методом Кеннеди. 1.2.4 Критерии определения эффективности: См. стандартное руководство ВОЗ по обследованию и диагностике бесплодных пар [10] и соответствующие критерии эффективности в Руководстве Министерства здравоохранения по клиническим исследованиям новых китайских лекарственных средств [11] в сочетании с реальной клинической ситуацией для пересмотра. Излечение: зачатие супруга или нормализация ферментов акросомы сперматозоидов, плотности и подвижности сперматозоидов; эффективность: хотя обычный анализ спермы не был нормальным, ферменты акросомы сперматозоидов, подвижность и подвижность сперматозоидов a-класса или a+b-класса были улучшены на ≥ 30%, а плотность сперматозоидов была улучшена на ≥ 2×106/мл после лечения олигоспермии; неэффективность: те, кто не соответствовал вышеуказанным критериям после лечения. 1.2.6 Метод статистической обработки Все экспериментальные данные были обработаны с помощью статистического пакета SPSS11.5, при этом P < 0,05 считалось существенным различием, а P < 0,01 - очень существенным. 2 Результаты экспериментов 2.1 Симптомы, признаки и общие наблюдения Все пациенты в двух группах в данном эксперименте принимали все препараты в соответствии с требованиями, и никаких значительных побочных реакций не наблюдалось. 2.2 Результаты анализа спермы В данных тестах двух групп пациентов, проведенных до лечения, данные активности фермента акросомы, объема спермы, плотности спермы, жизнеспособности сперматозоидов, жизнеспособности сперматозоидов, времени разжижения и значения pH были проверены с помощью t-теста, P > 0,05, и разница не была значительной. После лечения активность фермента акросомы, плотность спермы, подвижность и жизнеспособность сперматозоидов у пациентов обеих групп сравнивались с показателями до лечения в той же группе, и разница была значительной при P < 0,05 по t-тесту. Наблюдалась значительная разница в повышении активности фермента акросомы в группе отвара Цян Цзин по сравнению с группой капсул Шэн Шэн по t-тесту, P < 0,05. Разница в объеме спермы, времени разжижения и pH между двумя группами до и после лечения не была значительной по результатам t-теста, P > 0,05. Плотность спермы, жизнеспособность и жизнеспособность сперматозоидов сравнивались между двумя группами до и после лечения, с помощью t-теста, P > 0,05, разница не была значительной. Таблица 1: Таблица 1 Сравнение образцов спермы, протестированных до и после лечения (±s) Группа Количество случаев Активность фермента акросомы (мкМЕ/106 сперматозоидов) Объем спермы (мл) Плотность сперматозоидов (×106/мл) Группа отвара сильной спермы До лечения После лечения До лечения После лечения 30 30 30 30 30 29,879±10,513△ 49,548±8,443*◆ 31,686±8,748 42.797±9.000* 3.54±0.81△ 3.61±0.62 3.68±0.77 3.57±0.51 18.31±7.34△ 28.15±6.25* 18.87±6.70 27.46±6.19* Группа со сперматиновой капсулой Примечание: △ P > 0.05 по t-тесту до лечения по сравнению с группой со сперматиновой капсулой; * Та же группа после лечения по сравнению с группой до лечения. P < 0,05 по t-тесту после лечения по сравнению с группой до лечения; ◆P < 0,05 по t-тесту по сравнению с группой капсул для производства спермы после лечения. Таблица 1 (продолжение) Сравнение образцов спермы, протестированных до и после лечения (±s) Группа Количество случаев Класс жизнеспособности спермы a (%) Класс жизнеспособности спермы a+b (%) Класс жизнеспособности спермы a+b+c (%) Группа отвара сильной спермы Группа капсул для производства спермы До лечения После лечения До лечения После лечения После лечения 30 30 30 30 30 30 8.16±4.57△ 23.53±5.72* 6.08±4.28 22.52±4.10* 15.90±6.11△ 47.63±10.36* 15.67±4.88 45.34±7.56* 30.29±8.00△ 64.04±12.40* 30.82±7.82 60.48± 6,81* Таблица 1 (продолжение) Сравнение образцов спермы, протестированных до и после лечения (±s) Группа Количество случаев Время разжижения (мин) Значение pH Группа отвара крепкой спермы Группа капсул сырой спермы До лечения После лечения До лечения После лечения 30 30 30 30 30 30 22,0±5,54△ 21,57±3,91 22,0±5,42 22,57±5,96 7,48±0,28△ 7,48±0,23 0.23 7.45±0.34 7.38±0.34