Фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) является сильным митогеном эндотелиальных клеток и фактором роста сосудов [1]. Патологическое состояние дисбаланса клеточной пролиферации и апоптоза тесно связано с опухолегенезом и развитием. В данном исследовании мы изучили экспрессию VEGF в тканях рака яичников и его связь с апоптозом в клетках рака яичников, а также провели предварительное исследование его значимости. 1. Материалы и методы 1. 1 Клинические данные 45 образцов рака яичников были получены из архивных парафиновых блоков после хирургической резекции в нашей больнице с 1994 по 2001 год, включая 27 случаев плазматической кистозной аденокарциномы, 3 случая муцинозной кистозной аденокарциномы и 15 случаев эндометриоидной аденокарциномы. Возраст варьировался от 35 до 70 лет, средний возраст составил 51 год. Согласно классификации FIGO 1986 года, 14 случаев были на I-II стадиях и 31 случай на III-IV стадиях. В качестве контроля были выбраны 11 случаев нормальной ткани яичников, удаленных по поводу фибромиомы матки в тот же период, в возрасте 46 ~ 51 года, с медианой возраста 50 лет, и эти две группы были сопоставимы. 1,2 Методы. Экспрессию VEGF определяли иммуногистохимическим методом SP. Поликлональное антитело к VEGF было приобретено у Beijing Zhongshan Biotechnology Co. Апоптоз определяли методом опосредованного ник-эндом мечения терминальной дезоксинудеотидтрансферазы (TUNEL), реагенты были приобретены в Zhongshan Biotechnology Co. Образцы парафиновых блоков последовательно секционировались до толщины 4 мкм, а участки опухолевой ткани подвергались микроволновому восстановлению антигена. В качестве отрицательного контроля вместо первичного антитела использовался PBS. 1, 3 Определение результатов 1, 3, 1SP метод Окрашивание VEGF локализовалось в цитоплазме опухолевых клеток и/или клеточная мембрана окрашивалась в коричневато-желтый цвет (см. рис. 1). В соответствии с методом, описанным Liu Wei et al [2], пять полей с большим увеличением (× 400) были выбраны случайным образом для подсчета общего количества опухолевых клеток и количества положительных клеток, процент положительных клеток был получен и классифицирован в соответствии с уровнем положительности: чистый фон без окрашивания как -, положительные клетки <10% как +, положительные клетки 10%-70% как ++, положительные клетки >70% как +++. В данном исследовании -, является отрицательным; +, является слабо положительным; ++ и ++++ являются сильно положительными. 1,3,2TUNEL: Апоптотические клетки имели лавандовые ядра с фрагментированной, нерегулярной и изменчивой морфологией, тогда как нормальные неапоптотические клетки и отрицательный контроль имели синие ядра, повторно окрашенные гематоксилином, относительно крупные ядра и более равномерный морфологический размер. Пять полей с большим увеличением (× 400) были выбраны случайным образом для подсчета количества апоптотических опухолевых клеток ≥ 5% как положительных и < 5% как отрицательных [3]. 1, 4 Статистические методы. Односторонний ANOVA проводился с использованием статистического пакета SPSS10.0. 2, Результаты 2, 1 Экспрессия VEGF в тканях рака яичников 86,7% (39/45) клеток рака яичников экспрессировали VEGF, из них 12,8% (5/39) слабоположительно (+) и 87,2% (34/39) сильно положительно (++~+++); слабоположительная экспрессия наблюдалась в нормальных тканях яичников. Частота сильной положительной экспрессии VEGF в тканях рака яичников I-II стадии составила 35,7%, а в тканях III-IV стадии - 93,5%, причем разница между ними была значительной (P=0,001). 2,2 Апоптоз в тканях рака яичников. 60% (27/45) из 45 случаев рака яичников были положительными на апоптоз, а 40% (18/45) - отрицательными на апоптоз. Частота сильной положительной экспрессии VEGF в группе с отрицательным апоптозом составила 88,9% (16/18), а частота сильной положительной экспрессии VEGF в группе с положительным апоптозом составила 40,7% (11/27), при этом разница между ними была значительной (P=0,039). 3. ДИСКУССИЯ 3. 1 Рост и метастазирование опухоли - это сложный многоступенчатый процесс, на который влияет множество факторов. Среди них важную роль играет опухолевый ангиогенез. VEGF является одним из важных ангиогенных факторов и играет важную роль в ангиогенезе опухолей. Результаты данного исследования показали, что 39 (86,7%) из 45 образцов рака яичников имели различную степень экспрессии белка VEGF, включая 34 сильных положительных экспрессии, в основном при раке яичников III-IV стадии, и только 5 слабых положительных экспрессий, в основном при раке яичников I-II стадии, в то время как в нормальной коре яичников не наблюдалось сильных положительных экспрессий VEGF, а время выживания без опухоли и общее время выживания сокращалось с увеличением уровня VEGF. Это согласуется с сообщениями в литературе [4, 5]. Это указывает на то, что VEGF не только коррелирует со злокачественным фенотипом опухоли, но и играет ключевую роль в прогрессировании рака яичников, а его экспрессия тесно связана с прогнозом, что может быть использовано в качестве косвенного показателя для прогнозирования прогноза рака яичников. 3.2 Экспрессия VEGF и апоптоз при раке яичников Большинство ученых считают, что развитие и прогрессия опухоли является не только результатом неконтролируемой клеточной пролиферации, но также может быть обусловлена нарушением апоптоза, то есть дисбаланс между клеточной пролиферацией и апоптозом определяет скорость роста опухоли. На пролиферацию или апоптоз клеток влияет множество факторов, и это двусторонний регуляторный процесс. Экспериментальное применение метода TUNEL показало, что ткани рака яичников сопровождались апоптозом, причем процент положительных результатов составил 60%, что позволяет предположить связь между апоптозом и раком яичников. Исследования подтвердили, что неоваскуляризация возникает на ранних стадиях опухолевого генеза и развития, и что спонтанный апоптоз опухолевых клеток значительно зависит от степени неоваскуляризации в опухолевой ткани. Сообщается[6], что сосудистый фактор роста способствует росту опухолевых клеток и подавляет апоптоз опухолевых клеток, опосредуя ангиогенез. В настоящем исследовании положительный уровень экспрессии VEGF в апоптоз-негативной группе рака яичников был значительно выше, чем в апоптоз-положительной группе рака яичников, поэтому у нас есть основания сделать вывод, что блокирование ангиогенного эффекта VEGF может привести к торможению роста опухоли путем содействия апоптозу опухолевых клеток.