Секреты ревматоидного фактора, которые вы не должны знать

  Ревматоидный фактор (РФ) был впервые идентифицирован Роузом (1948) в сыворотках пациентов с ревматоидным артритом (РА) как аутоантитело, нацеленное на Fc-сегмент дегенерированного IgG. Клоны В-клеток, продуцирующие РФ, присутствуют у пациентов с РА и примерно у 5% здоровых людей, и могут синтезироваться в большом количестве под прямым действием дегенерированного IgG (IgG, связанного с антигеном) или EBV. У здоровых людей меньше клонов клеток, продуцирующих РФ, и продукцию РФ обычно нелегко обнаружить, поскольку растворимые факторы, секретируемые моноцитами, могут подавлять продукцию РФ.  RF содержится в различных иммуноглобулинах и реагирует с молекулами IgG различных животных, связываясь со своим Fc сегментом и соседними Fc сегментами, RF имеет пять категорий: IgG, IgA, IgM, IgE и IgD, IgG-RF может связываться сам с собой, образуя димер, этот димер связывается с двумя нормальными молекулами IgG, образуя промежуточный комплекс, связанный с васкулитом у пациентов с РА, в синовиальной оболочке. Димер IgGRF в синовиальной жидкости может далее образовывать мультимер, оседающий на поверхности хряща, активируя комплемент и вызывая повреждение сустава, которое невозможно измерить с помощью реакции непрямой агглютинации, поскольку это димер.  То, что мы сейчас измеряем с помощью теста агглютинации латекса, — это IgM-подобный RF. IgM-RF — это пентамер, который может связываться с Fc-сегментом пяти молекул IgG, покрытых латексными частицами, образуя большие пластинчатые отложения, которые можно наблюдать невооруженным глазом.  Метод латексной агглютинации для РФ: Реактивы: 1, латекс ревматоидного фактора 2, физраствор Основное оборудование: 1, U-образный круглодонный 72-луночный планшет для разведения 2, 25 стержней для разведения 3, шейкер Метод: 1, в планшет для разведения добавить физраствор, лунки 1, 2 75л, лунки 3, 4, 5, 6 25л 2. окуните палочку для разведения в сыворотку пациента (25 л) и поместите ее сначала в первую лунку, перемешайте 30-50 раз, затем перенесите во вторую лунку и так далее.  3. после перемешивания добавьте в первую лунку латекс без латекса, во вторую лунку — удвоенное количество латекса и добавьте по капле в третью, четвертую, пятую и шестую лунки. Хорошо встряхните на шейкере в течение 3-5 минут, поставьте в холодильник при температуре 4 градуса на ночь и достаньте на следующий день на один час для наблюдения за результатами.  Результаты: наличие реакции агглютинации считается положительным, и титр указывается для каждой лунки, к которой происходит агглютинация.  Кроме того, IgG, IgA и IgD-RF также могут быть определены методом двойного антигенного сэндвич ИФА, в котором термополимеризованный IgG человека или кролика используется в качестве антигена, покрытого ферментной пластиной, вместе с определенным разведением человеческой сыворотки, и реакция сопровождается добавлением наиболее подходящего разведения HRD (острый За реакцией следует добавление наиболее подходящего разведения HRD (острой пероксидазы), меченного термополимеризованного IgG, через определенный период времени добавляется субстрат и измеряется абсорбция при 492 нм.  Клиническое значение измерения РФ: РФ при ревматоидном артрите положителен примерно в 80% случаев, и является одним из важных серологических критериев для диагностики РА, но не единственным критерием, так как 5% нормальных добровольцев могут быть положительны на РФ, и частота позитивности может увеличиваться с возрастом. могут присутствовать инфекционные заболевания, такие как диффузный интерстициальный фиброз легких, цирроз печени и узелковая болезнь.  В активной фазе заболевания РА часто наблюдаются стойкие высокие титры РФ, а также высокая частота костных эрозий.