Ретроградная эякуляция (ретроградная эякуляция) — это когда во время полового акта происходит эякуляторное движение, удовольствие и оргазм, но сперма не эякулируется, а стекает обратно в мочевой пузырь. Это может вызвать мужское бесплодие. Вначале следует провести лечение с помощью техники стоячего полового акта, медикаментов или хирургического вмешательства для восстановления ретроградной эякуляции. Если эти методы лечения не помогают, сперму в моче после эякуляции можно извлечь для вспомогательной репродукции, чтобы решить проблемы бесплодия. Извлечению сперматозоидов из мочи пациентов с ретроградной эякуляцией для использования в ИУИ обычно предшествует многократное промывание каким-либо питательным раствором, что снижает скорость извлечения сперматозоидов. В данной работе мы использовали прямое мочеиспускание в жидкость HTF-HEPES (овидуктальная жидкость человека с буфером HEPES) после эякуляции, немедленно центрифугировали без промывки и извлекли жизнеспособные сперматозоиды (класс a + класс b) непосредственно методом восходящего потока для внутриматочной инсеминации (ВМИ) с успехом, о котором сообщается следующее: I. Данные и методы 1. В течение 4 лет в зарубежной клинике ему ставили диагноз «ретроградная эякуляция», назначали травяные препараты и эфедрин, но не смогли восстановить прогрессивную эякуляцию; позже, после цистоскопии, ему поставили диагноз «гиперплазия семенного канатика» и провели трансуретральную резекцию семенного канатика, но не смогли восстановить прогрессивную эякуляцию; он также не смог восстановить прогрессивную эякуляцию после стоячего полового акта с полным мочевым пузырем. В анамнезе не было сахарного диабета, травм позвоночника, операций на шейке мочевого пузыря или забрюшинном пространстве, а также отклонений при физикальном обследовании. Супруга была 27 лет, с регулярными менструациями и патентной трубной ангиограммой. 2. Извлечение сперматозоидов: За неделю до осеменения была начата диета с низким содержанием белка, накануне и утром осеменения был принят 1 г бикарбоната натрия, за 1 час до осеменения были выпиты две бутылки чистой воды (приблизительно 1200 мл), мочевой пузырь был опорожнен дважды через 1 час, а сразу после мастурбации и эякуляции моча была помещена в стерильный контейнер, содержащий 10 мл раствора HTF-HEPES, предварительно подогретого при 37°C. Две пробирки были разделены и немедленно центрифугированы при 300g x 10 мин. Центрифугируйте, отбросьте супернатант, добавьте в каждую пробирку 0,5 мл раствора HTF-HEPES, предварительно прогретого при 37℃, и поместите в 5% CO2 инкубатор при 37℃ на 1 час. 3. мониторинг овуляции и ВМИ: вводите 75 ЕД ХМГ внутримышечно на 5, 7 и 9 дни менструального цикла, вводите 10 000 ЕД ХГЧ внутримышечно на 12 день и проводите ВМИ на 13 день, когда появляются признаки овуляции, т.е. аспирируйте 0,5 мл восходящей жидкости специальной трубкой для введения ВМИ, осторожно поместите ее в полость матки и медленно вводите, остальное вводите в задний свод и лежите в положении лежа с приподнятыми бедрами в течение 1 часа. Через 2 недели после осеменения был проведен анализ мочи на ХГЧ, а через 6 недель было проведено УЗИ для проверки пульсации сердца. II. Результаты Было собрано 22 мл мочи (включая 10 мл жидкости HTF-HEPES), общее количество сперматозоидов составило 169×106 (77/10HPF) и процент жизнеспособных сперматозоидов 54%; после восходящего потока плотность сперматозоидов составила 68×106/мл (68/HPF), а процент жизнеспособных сперматозоидов увеличился до 91%. Беременность протекала успешно, и путем кесарева сечения родилась здоровая девочка с весом 3400 г. С развитием современных технологий вспомогательной репродукции для решения проблемы бесплодия пациентов с ретроградной эякуляцией сперматозоиды могут быть извлечены непосредственно из мочи после эякуляции для вспомогательной репродукции, а извлечение определенного количества сперматозоидов из мочи, восстановление и поддержание жизнеспособности является залогом успешной беременности. Извлечение определенного количества сперматозоидов из мочи, а также восстановление и поддержание жизнеспособности являются необходимыми условиями для успешной беременности. Существует два метода извлечения спермы из мочевого пузыря — инвазивный и неинвазивный. Первый заключается в замене мочи путем введения небольшого количества изотонического буфера перед мастурбацией для извлечения спермы, а затем извлечение суспензии спермы после мастурбации путем повторного введения трубки или опорожнения мочевого пузыря для извлечения суспензии спермы. Последний метод предполагает изменение осмотического давления и рН мочи перед мастурбацией для уменьшения повреждения сперматозоидов, мочеиспускание после мастурбации и обработку мочи различными культурами для восстановления определенного количества жизнеспособных сперматозоидов. Контакт сперматозоидов с мочой в течение 5 минут снижал жизнеспособность примерно на 50% и вызывал необратимые повреждения при длительном контакте; нейтрализация PH мочи не защищала от повреждения жизнеспособности сперматозоидов мочой, если одновременно не регулировалась осмоляльность мочи; Ким[1] и др. отметили, что чем выше концентрация мочи, тем хуже жизнеспособность сперматозоидов при регулировании PH мочи до 7,5 и осмоляльности до 340 мОсм/кг, и что среди различных азотистых компонентов аммиак в моче отрицательно влияет на жизнеспособность сперматозоидов. Поэтому уменьшение времени контакта между спермой и мочой, регулирование осмолярности и рН мочи, а также снижение количества аммиака в моче являются ключевыми факторами для получения высококачественных сперматозоидов и улучшения фертильности. Значение pH нормальной спермы составляет 7,2-7,8, что является слабощелочным, в то время как нормальная моча является слабокислой, со средним значением pH 6,0. Сперматозоиды легко повреждаются в слабокислой среде мочи, и их жизнеспособность снижается, но они могут восстановиться, если повреждения не являются чрезмерными. Пероральный бикарбонат натрия является наиболее часто используемым методом ощелачивания мочи, который повышает рН мочи и уменьшает чрезмерное повреждение сперматозоидов. У вегетарианцев нейтральная или слабощелочная моча и низкая концентрация азотистых соединений в моче. Поэтому низкобелковая диета на неделю вперед может повысить рН мочи и снизить концентрацию аммиака в моче, уменьшая чрезмерное повреждение сперматозоидов. В нормальных условиях осмотическое давление спермы низкое, а осмотическое давление мочи высокое. У пациентов с ретроградной эякуляцией сперма эякулируется в мочевой пузырь, а высокое осмотическое давление мочи вызывает повреждение мембраны сперматозоидов и снижает их жизнеспособность. Питье большого количества воды разбавляет мочу, снижая осмотическое давление, а также разбавляет концентрацию мочевого аммиака, уменьшая чрезмерное повреждение сперматозоидов. Слив мочи непосредственно в раствор HTF-HEPES немедленно разбавляет мочу и дополнительно регулирует pH мочи, защищая сперматозоиды. Однако каждый раз, когда супернатант центрифугируется и выбрасывается, определенное количество сперматозоидов теряется, и суспензия спермы содержит большое количество клеточного мусора и мертвых сперматозоидов, что приводит к низкому проценту жизнеспособных сперматозоидов, что не способствует наступлению беременности, поэтому промывание следует проводить как можно реже или чаще. Метод восходящего потока может уменьшить количество клеточного мусора и мертвых сперматозоидов, увеличить процент жизнеспособных сперматозоидов и в то же время позволить сперматозоидам получить энергию, что благоприятно для беременности. Поэтому сочетание диеты с низким содержанием белка, перорального приема бикарбоната натрия и большого количества воды, опорожнения мочевого пузыря дважды, мочеиспускания в стерильный контейнер с жидкостью HTF-HEPES сразу после эякуляции и центрифугирования сразу после этого может уменьшить время контакта сперматозоидов с мочой, ощелочить мочу, снизить осмотическое давление мочи и уменьшить содержание азота в моче и защитить сперматозоиды. Это увеличивает количество извлеченных жизнеспособных сперматозоидов и повышает процент жизнеспособных сперматозоидов, позволяя им быть жизнеспособными и достичь успешной беременности. Если количество жизнеспособных сперматозоидов, полученных из мочи, слишком мало для проведения ВМИ, может быть проведена интрацитоплазматическая инъекция одного сперматозоида (ИКСИ), о чем успешно сообщалось в Китае и за рубежом. По мнению автора, сочетание диеты с низким содержанием белка, перорального приема бикарбоната натрия, обильного питья воды, мочеиспускания непосредственно в культуру после эякуляции, уменьшения количества подмываний и применения метода восходящего потока может увеличить количество жизнеспособных извлеченных сперматозоидов и повысить вероятность зачатия.