В отделении детской нефрологии мы часто сталкиваемся с тем, что родители детей, у которых в анализе мочи есть пропуски, спрашивают врача об оккультной крови и эритроцитах в анализе мочи. Как проводится лабораторное исследование оккультной крови и эритроцитов в моче в рутине? Сегодня мы поделимся с вами небольшими знаниями, чтобы мы могли учиться и прогрессировать вместе. Прежде всего, принцип работы анализатора мочи на оккультную кровь: гемоглобин (Hb) пероксидазной активностью метаэмоглобина может производить разложение перекиси с выделением нового экологического [O], при окислении последнего субстратом о-толуидином в о-бензиламин происходит изменение цвета от желтого → зеленого → синего. Микроскопия мочи через увеличительный эффект микроскопа непосредственно клеток и других образовавшихся компонентов, интуитивно представленных под микроскопом, является истинным отражением субстрата. Гао Сюгуан, отделение педиатрии, Первый филиал Хэнаньского колледжа традиционной китайской медицины Анализатор мочи для обнаружения оккультной крови в моче, в смешанную 10 мл свежей мочи погружают тест-полоски на 1 с и затем вынимают, на приборе для определения автоматически печатаются результаты. Протокол результатов подразделяется на: -, ±, +, ++, +++, ++++, ++++. Микроскопическое исследование: взять 10 мл мочи в пробирку, центрифугировать при 1500 об/мин в течение 5 мин, отбросить надосадочную жидкость и оставить 0,2 мл осадка. Хорошо перемешать, взять около 20 мкл на предметное стекло, наложить покровное стекло (2,0 см × 2,0 см), затем наблюдать всю картину при малом увеличении с использованием более слабого света, чтобы не пропустить небольшое количество значимых объектов, и затем идентифицировать клетки при большом увеличении. Результат записывается как: х клеток/поле зрения с большим увеличением (HP). Как считать, если на лабораторном листе несколько знаков «плюс», все просто 1 знак «плюс» равен 10 эритроцитам. Ложноположительные результаты: то есть реакция анализатора мочи на скрытую кровь положительная, а микроскоп отрицательный, то есть в микроскопе нет эритроцитов, распространенные причины: (1) гемоглобин (Hb): реакция анализатора мочи на скрытую кровь может происходить как с интактными RBC, так и может быть положительной реакцией с высвобождением Hb при растворении RBC, и микроскоп может быть обнаружен только в моче RBC не растворенных. количество Hb в моче здорового человека очень мало, качественно отрицательно. У здоровых людей количество Hb в моче минимально и качественно отрицательно. При заболеваниях существует два источника поступления Hb с мочой: первый — это внутрисосудистый гемолиз, при котором плазменный Hb превышает связывающую способность связанных белков-бусинок и свободный Hb выделяется с мочой. Другой вариант — кровотечение из мочевыводящих путей (особенно верхних), при котором РБК, разрушающие Hb, выходят из мочи в гипертоническом или (и) гипотоническом состоянии. В этом случае анализ мочи дает положительную реакцию на оккультную кровь, но при микроскопическом исследовании осадка мочи RBC не видны или видны только фрагменты RBC. (2) Миоглобин (Mb): молекула также содержит гемоглобиновые группы и обладает пероксидазной активностью. Mb в основном содержится в тканях сердечной и скелетной мускулатуры, и его содержание в моче нормального человека очень мало и не может быть обнаружено. При серьезном повреждении миокарда или скелетных мышц содержание Mb в плазме крови увеличивается за счет почечной экскреции, в результате чего содержание Mb в моче возрастает, и реакция на оккультную кровь становится положительной, а микроскопическое исследование RBC — отрицательным. (3) Моча некоторых пациентов содержит неустойчивые к нагреванию ферменты, которые также могут вызывать изменение цвета блока реагентов, что приводит к положительной реакции на оккультную кровь и отрицательному микроскопическому исследованию. (4) Некоторые окислительные загрязнители, например гипохлорит, могут вызывать ложноположительные реакции на оккультную кровь. (5) Бактериурия: моча является хорошей культуральной средой для бактерий, и некоторые бактерии при бактериурии вырабатывают окислительные вещества, которые изменяют цвет блока реагентов, что приводит к положительной реакции оккультной крови и отрицательному микроскопическому исследованию RBC. Кроме того, вторжение микробной пероксидазы также может стать причиной ложноположительных результатов. (6) Эксперименты с длительным хранением и высокой температурой доказали, что несвежие, длительно хранящиеся или хранящиеся при высокой температуре образцы увеличивают процент положительных результатов реакции оккультной крови, а микроскопическое исследование RBC, соответственно, снижается, и вероятность получения ложноположительных результатов теста очень высока. Поэтому рекомендуется хранить образцы мочи не более 4 часов. (7) Ложноположительные результаты могут быть вызваны просроченными или загрязненными тест-полосками для анализа мочи, а также неправильным хранением и неправильным обращением. (8) Чувствительность анализатора мочи слишком высока (0,2 мг/дл появляется ++), диапазон «разницы уровней» слишком велик (0,8 ~ 50 мг/дл уровня +++), часто встречается приборный тест на ++, в то время как микроскопическое исследование эритроцитов отрицательно, и клинически не удается найти причину гемоглобинурии. (9) Влияние пищи или лекарств: когда моча становится щелочной из-за диеты или лекарств, эритроциты растворяются и разрушаются, образуя коричневые частицы, и реакция на оккультную кровь оказывается положительной, тогда как микроскопический тест — отрицательным. Анализируя вышеперечисленные девять причин, можно сказать, что если в анализе мочи присутствует простая оккультная кровь со знаком плюс, есть ли проблемы с почками, есть ли эритроциты в моче — это вопрос, который может быть использован только в качестве ориентира в клинике. Если при микроскопическом исследовании эритроциты действительно присутствуют, необходимо провести дополнительное обследование для определения источника эритроцитов. Ложноотрицательный результат: положительная микроскопия, т.е. в моче при микроскопии присутствуют эритроциты, но реакция оккультной крови на анализаторе мочи отрицательная, и ее распространенными причинами являются: (1) наличие VitC в больших количествах в моче может конкурировать за захват кислорода, выделяемого при реакции, вызывая ложноотрицательную реакцию. (2) Высокий удельный вес, большое количество белка в образцах мочи снижают чувствительность реагента, блокирующего реакцию оккультной крови, в результате чего реакция оккультной крови оказывается ложноотрицательной. (3) Повышенное содержание слизи в моче приводит к инкапсуляции RBC и невозможности контакта реагента с Hb, что делает реакцию на оккультную кровь ложноотрицательной. При отсутствии в анализе мочи оккультной крови и наличии трех вышеперечисленных условий оккультная кровь отрицательна, что также должно вызывать сомнения. Метод анализатора мочи для обнаружения эритроцитов в моче исключительно чувствителен, иногда возникают расхождения с результатами микроскопии, для полного учета факторов, влияющих на результаты, и в сочетании с комплексным клиническим анализом, в принципе, анализатор мочи оккультной реакции крови при положительных результатах должен быть повторно исследован с помощью микроскопии, что является важной частью обеспечения качества анализа мочи и залогом хорошей работы. Для анализатора мочи метод определения отрицательных результатов и микроскопического несоответствия также должен быть пересмотрен, чтобы обеспечить точность и достоверность результатов. Это является одной из причин обращения в детское нефрологическое отделение и повторного проведения врачом рутинного анализа мочи. Также отмечается, что пока ни один прибор не может полностью заменить микроскопию, и микроскопия осадка мочи по-прежнему остается незаменимым тестом в анализе мочи, имеющим уникальную клиническую ценность. В нашей детской нефрологической лаборатории микроскопия осадка мочи является обязательной частью эксперимента, поэтому при амбулаторном обследовании детей родителям всегда предлагается направить мочу в педиатрическую лабораторию на шестом этаже. Поэтому рекомендуется направлять детей с заболеваниями почек в лабораторию с микроскопией для проведения рутинного анализа мочи.