Фенилкетонурия вызвана снижением синтеза меланина из-за ингибирования тирозиназы, что приводит к бледно-коричневому цвету волос. Фенилкетонурия (ФКУ) — это генетическое заболевание, при котором нарушается обмен фенилаланина из-за дефицита или сниженной активности фенилаланингидроксилазы (ФГА) в печени. Это заболевание относительно часто встречается среди наследственных нарушений обмена аминокислот. При диагностике заболевания особое внимание следует уделять ранней диагностике, чтобы можно было получить своевременное лечение и избежать умственной отсталости. Скрининг на фенилкетонурию должен проводиться у новорожденных для получения раннего диагноза. 1. методы скрининга: международно признанным рутинным методом скрининга является метод ингибирования бактерий, открытый Гатри. Наборы для скрининга PKU доступны в Китае. Этот метод предполагает оценку уровня фенилаланина в крови на основании размера полосы роста Bacillus subtilis в культуре парной крови ребенка. Если расчетный уровень фенилаланина в крови составляет 0,24 ммоль/л, то тест положительный. Этот метод может быть использован у младенцев через 3-5 дней после рождения. Неонатальный скрининг больше подходит для новорожденных с семейной историей фенилаланина. 2. нагрузочный тест с фенилаланином: этот тест дает прямое представление об активности ПАУ. Нагрузочная доза составляет 0,1 г/кг фенилаланина, принимаемого перорально в течение 3 дней. Уровень фенилаланина в крови выше 1,22 ммоль/л у детей с классическим ПКУ и часто ниже 1,22 ммоль/л в легких случаях, последний результат позволяет предположить, что эти дети могут быть гиперфенилаланинемическими без ПКУ. Этиологическая диагностика: Геном, ответственным за фенилкетонурию, является ген PAH, а этиологическая диагностика заключается в обнаружении мутаций в гене PAH, что может быть использовано не только для этиологической диагностики пациента, но и для пренатальной диагностики плода. У большинства пациентов существует корреляция между генотипом и фенотипом. Степень влияния различных типов мутаций на активность PAH различна, поэтому тестирование на мутации в гене PAH также может быть полезно для определения прогноза и направления лечения. Существует множество методов выявления мутаций в гене PAH, но мультиплексная ферментная цепная реакция (ПЦР) используется в сочетании с одним или двумя из последних тестов, включая однонитевой конформационный полиморфизм (SSCP), полиморфизм длины рестрикционных фрагментов (RFLP), денатурирующий градиентный гель-электрофорез (DGGE), прямое секвенирование ДНК, олигонуклеотидные зонды, специфичные для сайта мутации (ASO), ПЦР-полипропилен-амин гель-электрофорез-серебряное окрашивание, дидезокси-фингерпринтинг, система амплификации-рефракторимутации (ARMS), методы ферментного лизиса несоответствий и т.д. Амплифицированная ДНК может быть проанализирована, а РНК также может быть проанализирована методом SSCP. Лимфоциты периферической крови используются для анализа образцов, а полярные тела (продукты гамет) могут быть проанализированы для пренатальной диагностики. Анализ полярных тел и ASO можно использовать для пренатальной диагностики, а метод ASO также можно использовать для генов PAH с известными локусами мутаций. В Китае наиболее распространены пять мутаций PAH: R243Q, Y204C, V399V, Y356X и R413P. На эти пять мутаций PAH приходится 56,7% всех мутаций. Среди мутаций наиболее распространенными были точечные мутации, на которые приходится 77,4% всех типов мутаций. Хуан Шанчжи предложил быструю процедуру диагностики мутаций PAH: шаг 1 для анализа олигонуклеотидного зонда, специфичного для участка мутации, диагностический показатель может достичь 66%; шаг 2 для анализа SSCP экзона 4, диагностический показатель увеличивается до 80%; шаг 3 для анализа SSCP нескольких распространенных участков мутации, а именно R243Q (экзон 7), V339V и Y356X (экзон 11), может обеспечить диагностический показатель 87%. диагностический показатель 87%. Обнаружение гена PTPS также основано на ПЦР в сочетании с методом DGGE, что позволяет провести скрининг шести кодирующих последовательностей этого гена и всех сайтов сплайсинга гена PTPS.