Передача врожденной цитомегаловирусной инфекции от матери к ребенку и диагностика
Врожденный цитомегаловирус (cCMV) является наиболее распространенной врожденной вирусной инфекцией у людей. Она относится к детям, рожденным от CMV-инфицированных матерей, у которых CMV-инфекция подтверждена в течение 2-3 недель после рождения и вызвана внутриутробной инфекцией. Каждый год в США примерно 27 000 серологически отрицательных беременных женщин первично инфицируются ЦМВ, и ежегодно заражаются 30 000-40 000 младенцев. Недавний метаанализ показал, что частота врожденной CMV-инфекции в слаборазвитых странах составляет 1,2% (0,9%-1,3%), а в умеренно развитых странах — 0,39% (0,3%-0,5%). Только 10% врожденных CMV-инфекций являются симптоматическими инфекциями, такими как микроцефалия, отек головного мозга, внутричерепная или внутрибрюшная кальцификация и т.д. Уровень заболеваемости и смертности составляет от 30% до 40%. У остальных 90% детей при рождении нет клинических симптомов, но у 10%-15% наблюдаются последствия, включая нарушение слуха и умственную отсталость. 20%-30% детей со слуховой глухотой вызваны CMV-инфекцией.
I. Передача цитомегаловируса от матери к ребенку
(A) Материнская заболеваемость
Уровень заболеваемости CMV-инфекцией среди населения высок, а частота серопозитивности CMV у женщин детородного возраста связана с их социально-экономическим статусом. 55% женщин детородного возраста в развитых странах имеют ЦМВ, а в экономически слаборазвитых странах — 85%. Половина женщин в Великобритании серологически положительны на CMV во время дородового скрининга. В Китае уровень инфицированности женщин детородного возраста составляет 60%. Эпидемиологическое исследование в Ухане, Шэньяне и Шанхае в Китае показало, что уровень инфицированности CMV беременных женщин достигает 79% и 97%, а уровень активной инфекции составляет 11,23%. Инфекция у беременных матерей может быть первичной, вторичной или повторной инфекцией другим штаммом CMV. Считается, что сама беременность может повысить восприимчивость женщины к CMV или привести к активации латентной инфекции. Активная материнская инфекция во время беременности (включая первичную инфекцию, экзогенную реинфекцию или реактивацию эндогенной латентной инфекции) может привести к врожденной инфекции плода и новорожденного. Материнская ВИЧ-инфекция, недоношенность и госпитализация в отделение интенсивной терапии являются факторами высокого риска врожденной ЦМВ-инфекции.
(ii) Путь передачи вируса от матери к ребенку
Вирус ЦМВ может передаваться внутриутробно через плацентарную инфекцию, во время родов через контакт с акушерскими выделениями и кровью, а после рождения — через грудное молоко и слюну. Внутриутробная передача осуществляется в основном через плаценту. Эксперименты на животных показали, что плацента заражается первой после инфицирования матери, и в зараженных CMV клетках межворсинчатого пространства скапливается большое количество лейкоцитов с характерными тельцами включения. Сразу после этого вирус переходит через плацентарный барьер к плоду. Другой путь заключается в том, что инфицированные WBC попадают в кровообращение плода через пупочные сосуды, вызывая гематогенную передачу вируса.
Deng Dongrui и др. показали, что инокуляция вируса может привести к инфекции у 100% беременных крыс и 94,57% потомства. Инфицированный вирус в основном находился в цитоплазме стромальных клеток эндометрия, эндотелиальных клеток сосудов и лейкоцитов, а нейтрофилы могли переносить вирус в эндотелиальные клетки маточных капилляров, которые далее инфицировали трофобласт эндотелиальных клеток сосудов неподвижных ворсин, что приводило к плацентарной инфекции и дегенеративным изменениям ворсин. Это, в свою очередь, может быть одной из причин аномального роста и развития потомства. CMV может выделяться из мочеиспускательного канала или шейки матки во втором триместре беременности, поэтому младенец может быть инфицирован при контакте с выделениями родового канала или кровью во время родов; поскольку CMV существует в материнской слюне, грудном молоке и других выделениях, постнатальная инфекция в основном передается новорожденному через тесный контакт с матерью и через грудное молоко.
(C) Факторы, влияющие на передачу инфекции от матери к ребенку
Неблагоприятное воздействие CMV на потомство при вертикальной передаче от матери к ребенку зависит от типа вируса, вирулентности, тканевого сродства, стадии развития плода и иммунного статуса матери и ребенка. Распространенность и тяжесть CMV-инфекции плода зависят от времени инфицирования матери во время беременности. Частота инфицирования плода у тех, кто заразился в начале и середине беременности, высока, а риск серьезен. Факторы, влияющие на передачу вируса от матери к ребенку, следующие.
1. первичная инфекция или рецидивирующая инфекция: CMV-инфекция у беременных женщин во время беременности включает первичную инфекцию и рецидивирующую инфекцию. Первичная инфекция относится к первичной инфекции. Рецидивирующая инфекция относится к активации (реактивации) эндогенного латентного вируса или реинфекции (повторному заражению) экзогенным штаммом другого вируса или большим количеством вируса того же штамма. Как первичная, так и повторная инфекция могут вызвать врожденную CMV-инфекцию, причем первичная инфекция с большей вероятностью передается плоду, чем повторная.
В анализе Meat, Kenneson et al. показали, что частота передачи первичной инфекции от матери к ребенку у беременных женщин составляет 32%, в то время как частота передачи повторной инфекции составляет 1,4%. Первичная инфекция возникает у 1-4% серологически отрицательных женщин до беременности во время беременности, и риск передачи вируса плоду составляет 30%-40%; 10%-30% серологически положительных беременных женщин до беременности реинфицируются во время беременности, и риск передачи вируса составляет 1%-3%. Риск повторного заражения составляет 1,3%. Риск выделения с мочой первичной инфекции в 10 раз выше, чем при повторном заражении, а доля младенцев с симптомами и долгосрочными последствиями выше, чем при повторном заражении. Менее 10% матерей детей с тяжелыми последствиями имели повторные инфекции во время беременности, а 0,2%-1,5% новорожденных, родившихся у беременных женщин с повторными инфекциями, имели последствия.
Еще в 1980-х годах Стагно и др. показали, что тератогенный эффект врожденной CMV-инфекции (поражение слуха и центральной нервной системы) в основном обусловлен первичной CMV-инфекцией во время беременности, а сейчас исследования показывают, что как первичная, так и рецидивирующая инфекции оказывают тератогенный эффект, и что рецидивирующие инфекции также могут привести к нейроразвивающим аномалиям и таким последствиям, как слуховая глухота. Большинство врожденных CMV-инфекций вызваны повторным заражением, на долю которого приходится 30-50% врожденных инфекций. Матери с повторной инфекцией имеют иммунитет к CMV, поэтому вирулентность при инфекциях плода снижается, но полностью предотвратить инфекции плода невозможно. В исследовании 64 младенцев с приобретенной врожденной CMV-инфекцией вследствие повторного заражения матери ни один из них не родился с симптомами, и только у 8% развились долгосрочные последствия. Если беременная женщина больна СПИДом, она склонна к передаче ЦМВ плоду, даже если она повторно инфицирована.
2. Материнская вирусная нагрузка: Хуан Цили и др. использовали количественную ПЦР для определения материнской вирусной нагрузки, которая может предсказать возможность передачи вируса от матери к ребенку. Если уровень CMVDNA в материнской сыворотке меньше или равен 1O, внутриутробную инфекцию можно исключить, а если уровень CMVDNA в сыворотке ≥l0, вероятность внутриутробного инфицирования плода составляет 100%. Чувствительность и специфичность считались равными 82, 3% и 100%, соответственно. Однако исследование Li Ping et al. несколько отличалось от этого, в их исследовании внутриутробная инфекция не возникала у беременных с числом копий CMVDNA <10, а при числе копий ДНК lO, l0, 1O и 10 частота внутриутробной инфекции составила 18, 75%, 28, 57%, 33, 33% и 60% соответственно. Уровень CMVDNA в крови беременных женщин определяет силу их вирусной инфекционности. Когда количество CMVDNA в крови достигает 2, 62X10 копий/мл или более, следует рассмотреть возможность внутриутробного инфицирования. 3, время инфицирования во время беременности: время инфицирования плода сильно различается по ущербу, наносимому плоду. Когда мать инфицирована CMV на ранних сроках беременности, поскольку плод находится в периоде эмбрионального развития, CMV, проникший в эмбриональные клетки, реплицируется в них, мешая нормальному делению и развитию эмбриональных клеток, так что развитие эмбриона затрудняется, возникают хромосомные мутации, которые могут вызвать врожденные пороки развития, выкидыш и мертворождение из-за нарушения дифференциации и развития его последующих тканей и органов. Однако из-за незрелости развития лейкоцитов в инфицированных клетках не происходит агрегации лейкоцитов, воспалительной экссудации и других реакций; после середины беременности CMV может вызвать внутриутробную задержку роста, повреждение центральной системы, мертворождение и мертворождение; на поздних сроках беременности CMV-инфекция в основном вызывает повреждение органов-мишеней плода; существует много органов-мишеней, атакуемых CMV, но наиболее уязвимыми являются печень, легкие и почки. Наиболее уязвимыми органами являются печень, легкие и почки. На средних и поздних сроках беременности, поскольку развитие лейкоцитов у плода уже завершилось, в дополнение к дегенерации и некрозу органов, пораженных CMV, происходит инфильтрация нейтрофилов, лимфоцитов, плазматических клеток и моноцитов; инфицированные клетки поражаются массивной репликацией CMV, образуя гигантские клеточно-подобные изменения и внутриклеточные тельца включения, сформированные репликацией CMV. При заражении на поздних сроках беременности плод родился с нормальным развитием, но плацента имела тяжелые поражения. У трех новорожденных была врожденная CMV-инфекция. Частота внутриутробной передачи первичной CMV-инфекции в ранние сроки беременности составила 30,8% (4/13). Таким образом, материнская CMV-инфекция на ранних сроках беременности представляет больший риск для плода, чем первичная CMV-инфекция до беременности. CMV-инфекция может подавлять клеточную иммунную функцию организма несколькими способами, и таким образом может избежать иммунной атаки организма и оставаться латентной в течение длительного времени. 4, социально-экономический статус и грудное вскармливание: экономические условия семьи также могут влиять на заражение CMV у беременных женщин. Stagno et al. в ходе исследования 16 218 беременных женщин установили, что 64,5% беременных женщин из группы с высоким уровнем дохода имели отрицательные антитела к CMV в сыворотке крови (восприимчивая группа), из них 1,6% имели первичную инфекцию во время беременности; 23,4% беременных женщин из группы с низким уровнем дохода имели отрицательные антитела к CMV в сыворотке крови, а 3,7% имели первичную инфекцию. Показатели внутриутробной передачи были одинаковыми в обеих группах (39% и 31%, соответственно). Среди врожденных CMV-инфекций 25% были вызваны первичной инфекцией в группе с низким уровнем дохода и 63% в группе с высоким уровнем дохода. Таким образом, частота первичной инфекции выше в группе с высоким уровнем дохода из-за высокой доли восприимчивых лиц, а воздействие на плод больше. Необходимо уделять больше внимания возникновению CMV-инфекции в этих группах после беременности. Цитомегаловирус обычно выделяется в грудное молоко, и серопозитивные по цитомегаловирусу женщины могут передавать вирус своим младенцам при грудном вскармливании. У доношенных детей большинство постнатальных инфекций ЦМВ через грудное молоко протекают бессимптомно и имеют низкий риск неврологических и глухих последствий. Таким образом, преимущества грудного вскармливания для доношенных детей значительно перевешивают минимальный риск передачи инфекции, что означает, что преимущества перевешивают риски, и поэтому доношенных детей можно продолжать кормить грудью. Однако с недоношенными детьми с низкой массой тела следует быть очень осторожными, поскольку у них повышен риск цитомегаловирусной инфекции. В бразильском исследовании недоношенные дети с гестационным возрастом <34 недель и массой тела при рождении <1500 г родились от матерей, серопозитивных к ЦМВ, но при рождении у новорожденных была подтверждена отсутствие ЦМВ-инфекции. Эти новорожденные после рождения находились на грудном вскармливании, что привело к инфицированию в 21 случае (22,1%), из которых 1О выделили вирус в течение 60 дней после рождения и 11 начали выделять после 60 дней. Анализ коэффициентов корреляции показал, что у этих новорожденных инфицирование не было связано с передачей вируса через кровь, массой тела при рождении и вагинальными родами, но было связано с кормлением грудью в течение первых 30 дней после рождения (OR=4,5, P=0,02) или кормлением грудью более 30 дней (OR=7,9, P<0,01). Только у одного из новорожденных были симптомы инфекции. Из приведенного выше исследования ясно, что раннее и длительное грудное вскармливание недоношенных детей, матери которых были серопозитивны по ЦМВ, повышало риск заражения ЦМВ. В другом зарубежном исследовании, включавшем 151 мать и их 176 недоношенных младенцев (гестационный возраст <37 недель или масса при рождении <1500 г), цитомегаловирус грудного молока можно было исследовать с помощью серологии, вирусной культуры и ПЦР. Оценка методом ПЦР показала, что у 73 из 76 (93%) кормящих женщин, серопозитивных на ЦМВ, вирус активировался в грудном молоке и передавался младенцу в 37%, у 27 из 73 матерей в грудном молоке был реактивированный цитомегаловирус человека, передававшийся 33 младенцам со средним временем заражения 42 дня. Несколько исследований, проведенных на нескольких континентах, подтвердили риск заражения ЦМВ у недоношенных детей с низкой и очень низкой массой тела при рождении, которые получали грудное молоко от серопозитивных по ЦМВ матерей. Инфекционность цитомегаловируса в грудном молоке эффективно устраняется пастеризацией; замораживание (20oC) и оттаивание снижают инфекционность цитомегаловируса в образцах грудного молока in vitro и уменьшают риск передачи ЦМВ через грудное молоко, но, похоже, не полностью устраняют этот риск, поэтому необходимы дальнейшие исследования для изучения относительной эффективности замораживания и оттаивания по сравнению с пастеризацией для предотвращения цитомегаловирусной инфекции у младенцев высокого риска. Необходимы дальнейшие исследования для изучения относительной эффективности замораживания-оттаивания по сравнению с пастеризацией для профилактики цитомегаловирусной инфекции у младенцев из группы риска. Таким образом, единого понимания того, можно ли кормить грудью новорожденного с детоксикацией без внутриутробной инфекции, нет, и я считаю, что лучше не кормить CMV-содержащим грудным молоком недоношенных и иммунокомпрометированных новорожденных, поскольку у них более вероятно развитие постнатальной инфекции, а вирус нелегко очищается после заражения. II. Диагностика ЦМВ-инфекции (А) Диагностика ЦМВ-инфекции у беременных женщин CMV-инфекция у беременных женщин обычно не имеет явных клинических симптомов, менее 5% имеют симптомы, очень немногие проявляются как синдром мононуклеоза. Те, у кого есть симптомы, могут проявляться постоянной лихорадкой, миалгией и опухшими лимфатическими узлами. Поэтому беременным женщинам трудно осознать, что они инфицированы и это передалось плоду, поэтому важно сначала определить, есть ли у беременной женщины инфекция CMV. Беременным женщинам желательно пройти серологическое обследование на CMV до беременности, чтобы определить, были ли они когда-либо инфицированы CMV. Если специфические антитела отрицательные, это означает, что они не были инфицированы CMV и являются восприимчивыми. Если после беременности специфические антитела меняются с отрицательных на положительные, это поможет в диагностике недавней первичной инфекции. Однако многие беременные женщины не тестировались на наличие специфических антител к CMV пренатально, поэтому при наличии специфических антител в крови необходимо дальнейшее подтверждение первичной инфекции, что поможет определить риск для плода.CMV, IgM может использоваться как показатель острой или недавней инфекции и может присутствовать во время первичной инфекции, но также часто встречается при экзогенной реинфекции или реактивации эндогенной латентной инфекции. IgM может сохраняться IgM может сохраняться до 18 месяцев и все еще может быть обнаружен через 6-9 месяцев после острой фазы первичной инфекции, но его чувствительность в диагностике первичной инфекции составляет всего 70%, поскольку результаты могут отличаться при использовании разных наборов. Он также может давать ложноположительные результаты при других инфекциях, таких как B19 и EBV. Серология первичной инфекции у большинства беременных женщин характеризуется положительностью CMV-IgM и отрицательностью IgG, или переходом от отрицательного к положительному IgM и/или IgG, или значительным повышением потенции с разницей в 3 недели. Большинство женщин, которые были инфицированы CMV до беременности и сероположительны на CMV-IgG, все еще могут инфицировать плод трансплацентарно, если латентный CMV в организме во время беременности активизируется или если они повторно инфицированы экзогенным CMV, и в этот момент IgM становится положительным. Аффинность CMV-IgG (IgGавидность) в настоящее время является наиболее надежным показателем для определения первичной инфекции. Аффинность антител представляет собой способность мультивалентных антител связывать мультивалентные антигены. Антитела, вырабатываемые во время первичной инфекции, имеют гораздо более низкое сродство к антигенам, чем при повторном заражении, а по мере созревания иммунного ответа сродство медленно увеличивается, поэтому низкое сродство свидетельствует об острой или недавней инфекции CMV. Измерение аффинности антител IgG материнской крови на 16-18 неделе гестации помогает выявить всех беременных женщин, которые могут вызвать инфекции плода и новорожденного, с чувствительностью 100%. Однако чувствительность значительно снижается после 20 недель беременности до 62,5%.121 Revello et al. предполагают, что низкий или высокий индекс аффинности IgG (AI) в течение первых 3 месяцев после заражения CMV указывает на недавнюю инфекцию, например, AI ≤ 50% и IgM позитивность указывает на недавнюю первичную инфекцию; AI > 65% может указывать на предыдущую инфекцию, и в 18 недель беременности Отрицательная предсказательная ценность составляет 100% в 18 недель беременности, но в 2l-23 недели беременности отрицательная предсказательная ценность составляет 90,9%.
Поэтому данный тест следует проводить в первом триместре беременности. Большинство акушерских отделений проводят только тест на CMV и IgM и игнорируют тест на IgG. Поэтому рекомендуется измерять антитела CMV-IgM и IgG у беременных женщин для определения первичной инфекции и повторного инфицирования. Если первичная инфекция происходит на ранних сроках беременности, из-за высокой вероятности инфицирования плода, с учетом нынешней ситуации, когда каждая семья в Китае имеет только одного ребенка, беременным женщинам можно посоветовать прервать беременность, чтобы избежать рождения врожденно инфицированных детей.
(В) Диагностика CMV-инфекции плода
1. Амниоцентез: Независимо от пути заражения, почечный тубулярный эпителий, по-видимому, является основным местом репликации вируса. Инфицированный плод выделяет вирус в амниотическую полость через мочеиспускание, поэтому амниотическая жидкость является хорошим способом выявления инфекции плода. Выделение CMV из амниотической жидкости и ПЦР на CMVDNA могут эффективно отличить инфицированный плод от неинфицированного. Если у беременной женщины есть подозрение на недавнюю инфекцию, особенно в первом триместре беременности, необходимо провести амниоцентез для пренатальной диагностики. Амниоцентез для культивирования CMV и проведения качественного и количественного ПЦР-тестов лучше всего проводить на 21 неделе беременности или через 6 недель после подозрения на инфекцию. Чувствительность и специфичность выделения вируса высоки (100% специфичности), а чувствительность метода ПЦР для выявления CMV и ДНК составляет 79,6%.
Выделение вируса в сочетании с ПЦР-тестом, вероятно, является лучшим методом пренатальной диагностики, а чувствительность комбинации этих двух методов может достигать от 80% до 100%. Однако выделение вируса в амниотической жидкости и/или положительный результат ПЦР не позволяет предсказать, будут ли симптомы у плода при рождении или останутся ли после него последствия. Постнатальные клинические симптомы связаны с количеством HCMV. guerra et al¨ обнаружили, что амниотическая жидкость была отрицательной для количественного определения CMV на 21-22 неделе беременности. У 100% плодов или новорожденных не развилась инфекция; количественное определение CMVDNA <10 копий/мл, у 81% плодов или новорожденных не развилась инфекция, ≥10 копий/мл, у 100% плодов или новорожденных развилась врожденная инфекция; CMVDNA < 10/мл, у 92% плодов или новорожденных нет клинических симптомов инфекции, ≥10 копий/мл, у 100% плодов или новорожденных есть клинические симптомы инфекции. 2. Анализ пуповинной крови: Кордоцентез может выявить специфические для CMV антитела IgM и количественно определить вирусную нагрузку в пуповинной крови. Поскольку специфические IgM-антитела могут быть измерены после 21 недели беременности, их чувствительность низкая, всего от 20% до 75%¨, но их специфичность достигает 100%. Его нельзя использовать как единственный метод исключения передачи вируса, но он все же полезен для диагностики врожденной инфекции плода. Из-за низкого уровня положительных результатов культуры вируса пуповинной крови, чувствительность антигенемии составляет 57,9%, чувствительность виремии - 55,5%, а специфичность - 100%. Недавно было сообщено о количественном тестировании на CMV для пренатальной диагностики. Revello и Gerna¨ взяли пуповинную кровь и измерили вирусную нагрузку CMV для пренатальной диагностики и обнаружили, что у 19 из 36 первично инфицированных беременных женщин произошла внутриутробная передача вируса, а чувствительность метода флуоресценции I ПЦР составила 82,3%. Ультразвуковое исследование выявило значительно более высокую вирусную нагрузку в группе с грубыми аномалиями и в группе с биохимическими/кровяными аномалиями пуповинной крови, чем в группе с субклинической инфекцией. Чувствительность диагностики пуповинной крови ниже, чем амниотической жидкости, и это инвазивный тест, который повышает риск спонтанного аборта, поэтому он редко используется для диагностики ЦМВ в Китае. 3. Непрерывное ультразвуковое исследование: оно позволяет контролировать общее развитие плода и может выявить грубые аномалии, такие как увеличенные желудочки, задержка роста, аномальная эхогенность в брюшной полости плода. Отсутствие аномальных находок не исключает функциональных повреждений, и есть сведения, что ультразвуковое исследование может выявить только 5% инфицированных CMV детей. (C) Диагностика CMV-инфекции после рождения 1, Серологическое тестирование: При диагностике врожденной CMV-инфекции серологические тесты менее чувствительны и специфичны, чем вирусные тесты, и поэтому не рекомендуются. Обнаружение CMV-IgG у новорожденных является маркером проникновения материнских антител через плаценту. Поскольку антитела IgM не могут проникнуть к плоду через плаценту, положительный результат на антитела CMV-IgM в течение 2-3 недель после рождения указывает на врожденную инфекцию CMV у новорожденных. Однако CMV, IgM-антитела могут давать ложноположительные и ложноотрицательные результаты. При инфекции CMV антитела IgM вырабатываются у разных людей непоследовательно, примерно у 27% людей антитела IgM не вырабатываются. Предполагается, что отсутствие антител IgM не полностью исключает инфекцию CMV. Хотя положительный результат на CMV и IgM у новорожденных свидетельствует о врожденной инфекции. Однако диагноз должен быть подтвержден выделением вируса, а отрицательный CMV-IgM не исключает врожденную инфекцию. В исследовании Roubing Shan et al¨, только 24 новорожденных с положительным результатом были положительны на количественную ПЦР крови, а в исследовании Yijuan Li et al, из 48 младенцев с диагнозом врожденной инфекции CMV, 7 были симптоматическими и 41 бессимптомным, и ни один не был положительным на CMV, IgM. У детей с серологически положительной сенсоневральной глухотой можно поставить диагноз только о перенесенной инфекции, но нельзя точно сказать, когда произошла инфекция (врожденная или приобретенная). Если не обнаружено низкое сродство к IgG, это указывает на недавнюю инфекцию. Сродство к IgG (IgGавидность) полезно для диагностики острых инфекций у взрослых, но нет информации о сродстве к IgG у новорожденных. 2, Метод быстрой культуры: Этот метод позволяет выявить CMV в течение 24-48 ч. После добавления диагностических образцов к монослоям клеток добавляются антитела, меченные иммунофлуоресценцией или иммунопероксидазой, для выявления ранних антигенов, продуцируемых инфицированными CMV клетками. 3. Выделение вируса и метод PcR: Берутся такие образцы, как кровь, моча и слюна, инокулируются в фибробласты, и вирус выделяется после культивирования. Это золотой стандарт диагностики инфекции CMV. Однако он не получил широкого клинического применения из-за своей громоздкости. ПЦР широко используется для выявления генома CMV, а ее чувствительность и специфичность зависят от диапазона генов CMV используемых зондов и применяемого метода. Хотя вложенная ПЦР более чувствительна, она также увеличивает риск ложноположительных результатов. Этот метод чувствителен, но не позволяет отличить первичную инфекцию от вторичной. Было высказано предположение, что положительная ДНК CMV в плазме представляет собой активную инфекцию. Поскольку некоторые компоненты мочи могут ингибировать некоторые ферменты в смеси ПЦР и влиять на результаты анализа, необходимо проводить внутренний контроль качества, чтобы избежать ложноотрицательных результатов. Сухое кровяное пятно: Используется для ретроспективной диагностики врожденной ЦМВ-инфекции. Поскольку для диагностики врожденной ЦМВ-инфекции требуется анализ крови или мочи на вирус через 2-3 недели после рождения, а у многих младенцев с подозрением на врожденную ЦМВ-инфекцию симптомы не проявляются до 2-3 недель после рождения или даже дольше, трудно определить наличие врожденной ЦМВ-инфекции. Поскольку подавляющее большинство новорожденных, рожденных в больнице, проходят скрининг на генетические и метаболические заболевания с помощью высушенной бумажной крови, взятой в течение 2 недель после рождения, кровь в этих бумагах может быть проверена на CMV, ДНК методом ПЦР. Ретроспективно диагностировать врожденную ЦМВ-инфекцию можно спустя много лет после рождения. Отрицательные результаты не могут исключить врожденную CMV-инфекцию из-за небольшого количества крови в бумажных предметных стеклах, всего 50-100'Ll, что ограничивает обнаружение. 4, обнаружение антигенемии ЦМВ: использование метода энзимно-меченых антител для обнаружения антигенемии ЦМВ, с использованием непрямого метода энзимно-меченых антител мышиного моноклонального антитела CIO/C11 (метод C10/C11), а также человеческого моноклонального антитела C7 прямым иммунопероксидазным методом (метод C7 a HRP). То есть метод, при котором антиген CMVpp65 выявляется путем нанесения иммуноокрашивания на лейкоциты и их детекции. Поскольку антигенемия CMV совпадает с началом инфекции CMV или может быть диагностирована на шаг вперед, диагностика антигенемии CMV поможет в ранней диагностике инфекции CMV или может быть использована для прогнозирования ее начала. В настоящее время она широко используется для прогнозирования начала и определения эффективности CMV-инфекции при трансплантации почек, сердца, легких, печени и костного мозга, а также при серьезных CMV-инфекциях, таких как CMV-ретинит и интерстициальная пневмония у ВИЧ-инфицированных пациентов. В случае положительной антигенемии диагноз внутриутробной CMV-инфекции может быть полностью установлен. Однако его чувствительность составляет всего 45,5%. Это говорит о том, что даже отрицательная антигенемия не исключает возможности внутриутробного заражения CMV. В заключение следует отметить, что данный метод пока не является компетентным при использовании только антигенемии в качестве диагностического теста для внутриутробной CMV-инфекции. Li Yijuan et al¨ vice исследовали CMV-IgM крови, CMV-антиген лейкоцитов периферической крови и PCRCMV-DNA слюны у 98 новорожденных высокого риска, чьи матери были положительны на CMV-IgM крови во время беременности в течение 14 дней после рождения, и обнаружили, что в 48 случаях диагностирована врожденная CMV-инфекция Чувствительность теста на антиген и ПЦР-теста составила 75% и 54%, соответственно. Тест на антиген ЦМВ является ранним, чувствительным и количественным, метод ПЦР может выявить латентную инфекцию, а совместное применение этих двух методов может улучшить положительную диагностику, метод CMV-IgM имеет низкую чувствительность для ранней диагностики врожденной инфекции ЦМВ. чувствительность низкая. Ancora и др. использовали краниальную ультрасонографию для прогнозирования аномалий нейроразвития у 57 детей с врожденной ЦМВ-инфекцией и наблюдали за детьми с нормальным краниальным ультразвуком до 3 месяцев, а за детьми с аномалиями - до 6 месяцев. В 12 случаях (21%) были обнаружены ультразвуковые аномалии, в основном включающие перивентрикулярную и желудочковую кальцификацию, увеличение желудочков, образование бурсы и небольшие повреждения головного мозга. Более того, у детей с лабораторными и клиническими признаками ЦМВ чаще встречались аномалии УЗИ головного мозга. КТ черепа выявляет не больше отклонений, чем УЗИ. МРТ пропустила 2 случая кальцификации (2/11), но обнаружила больше отклонений, чем УЗИ, в 6 случаях, таких как неврологическое нарушение миграции, дистрофия белого вещества головного мозга, замедленная миелинизация и одна киста, пропущенная УЗИ. За этими детьми наблюдали более 1 года, и из 2 детей с ультразвуковыми аномалиями 1 умер в неонатальном периоде от эмболии крупных артерий, у 1 было увеличение желудочков и образование кисты, а у остальных 10 прогноз был благоприятным. Таким образом, при симптоматической врожденной CMV-инфекции ультразвуковое исследование может использоваться в качестве скринингового инструмента для оценки прогноза, оно более экономично и удобно, чем другие методы визуализации, и может проводиться у постели больного.