Инвазивные легочные грибковые заболевания имеют нетипичную клиническую картину, которая легко маскируется основным заболеванием, а подтверждение диагноза обычно требует инвазивного взятия образцов тканей, что часто трудновыполнимо из-за ограничений, связанных с состоянием пациента. Поэтому существует высокий уровень недодиагностики. В настоящее время большинство больниц в Китае проводят неинвазивные лабораторные методы, такие как G-тест и GM-тест, в качестве одного из диагностических критериев грибковых инфекций, чтобы повысить процент положительных результатов при грибковых инфекциях. Но насколько значимы G-тест и GM-тест в диагностике грибковых инфекций? В чем разница между ними?
I. Что такое G-тест и GM-тест?
1.G-тест: также известен как тест на 1,3-бета-D-глюкан, который выявляет 1,3-бета-D-глюкан, компонент клеточной стенки грибов. 1,3-бета-D глюкан может специфически активировать фактор G в лизате деформированных клеток краба-подковы, вызывая коагуляцию лизата, поэтому его называют G-тестом.
2, GM тест: тест галактоманнан (глактоманнан, GM), галактоманнан является полисахарид широко присутствует в Aspergillus и Penicillium клеточной стенки, грибковой клеточной стенки поверхности роста мицелия, галактоманнан из слабой мицелия кончик релиза, является самым ранним релиз антигена, может быть обнаружен с помощью иммуноферментного анализа.
Во-вторых, значение обоих показателей в диагностике грибковых инфекций
Согласно диагностическому руководству по инвазивному легочному грибковому заболеванию, диагностические факторы грибковых инфекций включают факторы хозяина, клинические признаки, микробиологическое исследование и гистопатологию. Окончательная диагностика заболевания должна опираться на инвазивные тесты и операции, такие как гистопатология, а процесс культивирования занимает много времени, что неизменно увеличивает частоту недодиагностики. Новые серологические методы диагностики, включая G-тест, GM-тест, а для грибково-специфической ДНК — методы ПЦР, вместе с клиническими признаками, микробиологическими культурами и особенно компьютерной томографией дают возможность начать упреждающее лечение, контролировать течение болезни и оценивать реакцию на лечение более информативно. Среди них 2 последовательных положительных G-теста и GM-теста являются значимыми результатами тестирования.
После фагоцитоза грибов в организме человека 1,3-бета-D-глюкан постоянно высвобождается фагоцитами, что повышает его уровень в крови и биологических жидкостях. G-тест на 1,3-бета-D-глюкан является своевременным индикатором грибковой инфекции.
G-тест подходит для ранней диагностики всех глубоких грибковых инфекций, за исключением Cryptococcus и Splinterella (Trichophyton). Хотя можно измерить более патогенные грибки, включая Aspergillus и Candida, и предварительные клинические исследования показывают хорошую чувствительность и специфичность с низкой частотой ложноположительных результатов, он может только указать на наличие или отсутствие грибковой инвазивной инфекции и не может определить вид грибковой инфекции, что является недостатком этого метода.
Также ложноположительные результаты могут возникать в следующих случаях.
(1) Гемодиализ с использованием фибриновых мембран, когда образец или пациент подвергаются воздействию марли или другого материала, содержащего декстран;
(2) Внутривенная инфузия иммуноглобулинов, альбумина, факторов свертывания или препаратов крови;
(3) стрептококковая бактериемия;
(4) контаминация во время обработки образцов оператором. Кроме того, использование полисахаридных противораковых препаратов, повреждение слизистой оболочки в результате радиотерапии, приводящее к попаданию декстрана в пищу или колонизированной Candida в кровь через желудочно-кишечный тракт, также могут стать причиной ложноположительных результатов.
GM-тест в основном направлен на раннюю диагностику инвазивной инфекции Aspergillus. Очаг инфекции Aspergillus в основном сосредоточен в легких, что приводит к инвазивной инфекции Aspergillus в легких. Ключом к диагностике колонизационного или инвазивного роста Aspergillus в легких является то, синтезирует ли он ГМ. Если образец мокроты или альвеолярной лаважной жидкости культивирован с Aspergillus и результат теста на GM положительный, ставится диагноз инвазивной инфекции Aspergillus.
Тест GM часто бывает положительным за 5-8 дней до появления клинических симптомов, и может быть выполнен на сыворотке крови, спинномозговой жидкости, альвеолярной или бронхиальной лаважной жидкости, что часто позволяет поставить диагноз в более ранние сроки. Таким образом, GM-тест является одним из микробиологических доказательств для диагностики инвазивной инфекции Aspergillus, а значение GM может использоваться как один из контрольных показателей эффективности лечения.
GM-тест не эффективен для других грибковых тестов, а на его чувствительность и специфичность влияет множество факторов.
Ложноположительные результаты могут возникать в следующих ситуациях.
(1) Использование полусинтетического пенициллина, особенно пиперациллина/тазобактама;
(2) Новорожденные и дети;
(3) гемодиализ;
(4) Аутоиммунный гепатит и т.д;
(5) Употребление высокобелковых продуктов, таких как молоко и зараженный рис, которые могут содержать ГМ, и т.д.
Ложноотрицательные результаты могут возникать в следующих случаях.
(1) ГМ Trichoderma (включая маннан), попавший в кровь, не сохраняется, но быстро выводится из организма;
(2) Предыдущее использование противогрибковых препаратов;
(3) Заболевание не является тяжелым;
(4) Пациенты с дефицитом негранулоцитов.
В-третьих, клиническое применение
(1) G-тест и GM-тест обнаруживают разные вещества, законы метаболизма отличаются, факторы влияния также сильно отличаются, и они не могут заменить друг друга. Совместное применение этих двух методов может улучшить диагностическую способность инвазивных грибковых заболеваний.
(2) Как GM-тест, так и G-тест имеют ложноположительные результаты, и процент ложноположительных результатов может быть снижен путем многократного тестирования. Поэтому случаи с положительным G-тестом и GM-тестом по-прежнему необходимо сочетать с клиническими проявлениями, чтобы определить наличие грибковой инфекции.
(3) Китайские руководства по инвазивным грибковым заболеваниям принимают 2 последовательных положительных GM-теста в качестве критерия микробной инфекции. Раннее применение эмпирического лечения в клинике приведет к снижению концентрации ГМ в сыворотке крови и ложноотрицательным результатам, а критерий 2 последовательных положительных тестов на ГМ в сыворотке крови нелегко выполнить, что приведет к путанице в работе клиницистов.
(4) Наиболее распространенным фактором, влияющим на результаты теста на ГМ, является использование β-лактамных антибактериальных препаратов, особенно пиперациллина/тазобактама, поэтому при проведении анализа на галактоманнан Aspergillus пациентам следует избегать приема таких препаратов.