Хроническая болезнь почек (ХБП) в мировой заболеваемости демонстрирует тенденцию к росту, стала одной из наиболее обеспокоенных проблем здравоохранения в мире. В 2007 г. опубликованный Национальным институтом здравоохранения США при поддержке Национального исследования здоровья и питания США (NHANES) 1999-2004 гг. анализ результатов показал, что в США ХБП является заболеванием растущим. ЦП является растущим заболеванием в США. В Китае распространенность ЦП среди городского и сельского населения старше 18 лет в Пекине составляет 13%, и если ЦП эффективно не контролировать, то со временем он перерастет в хроническую почечную недостаточность (ХПН). Согласно статистическим данным, число диализных больных в связи с хронической почечной недостаточностью растет во всем мире: 426 тыс. в 1990 г., 1 065 тыс. в 2000 г. и, как ожидается, достигнет более 2 млн в 2010 г., однако в развивающихся странах, на которые приходится 80% населения мира, распространенность ХПН выше. При этом на развивающиеся и слаборазвитые страны, составляющие 80% населения планеты, приходится 10% от числа людей, находящихся на диализе, и большинство пациентов с конечной стадией почечной недостаточности в этих странах не имеют доступа к диализу для проведения жизненно необходимого лечения. В Китае, по данным неполного исследования, проведенного в двух крупных городах, Пекине и Шанхае, число новых пациентов, поступающих на гемодиализ, составляет около 4 тыс. случаев в год. При этом, хотя диализ и трансплантация могут спасти жизнь пациентам и улучшить качество их жизни, пациенты и их семьи, а также общество вынуждены нести огромные медицинские расходы независимо от диализа или трансплантации почки. В Китае по-прежнему много больных уремией, которые не имеют доступа к своевременному диализу, и еще меньше тех, кто может получить трансплантацию почки. Особенно в сельской местности и на западе страны пациенты все еще не могут получить диализ и трансплантацию и умирают от уремии. Поэтому перед медицинскими работниками встала непростая задача — активно изучать возможности безальтернативной терапии ХПН, чтобы облегчить боль пациентов и снять тяжелое бремя высоких затрат на лечение с семей и общества. Хроническая почечная недостаточность может развиваться из различных заболеваний, течение болезни длительное, патогенез сложный, как истощение положительной энергии, так и реальное злое препятствие, это дефицит стандарта, смешанное свидетельство дефицита и реальности. При лечении необходимо различать стандартное и реальное, а также учитывать вес положительного недостатка и зла для идентификации и лечения. После многолетнего клинического опыта эта группа пришла к выводу, что основным механизмом хронической почечной недостаточности является дефицит селезенки и почек, обструкция мутных образований и стаз, в соответствии с чем укрепление селезенки и тонизация почек, устранение мутных образований и стаз являются принципом лечения, и сформулировала гранулы для выведения токсинов (Dispelling Toxin Granules). В результате клинических и экспериментальных исследований выяснены эффективность и механизм действия метода тонизации селезенки и почек, устранения мутности и стаза в лечении ХПН на уровне молекулярной биологии, подтверждено, что метод тонизации селезенки и почек, устранения мутности и стаза обладает эффектом антипочечного интерстициального фиброза и антигломерулярного склероза, может вмешиваться в длительное (1-6 лет) течение хронической почечной недостаточности и замедлять прогрессирование хронической почечной недостаточности, а также является эффективным методом лечения этого заболевания традиционной китайской медициной. Данная тема позволяет достичь поставленной цели. I. Экспериментальное исследование 1. Влияние отхаркивающих гранул на интерстициальный фиброз почек у крыс с односторонней обструкцией мочеточника Цель: изучить влияние отхаркивающих гранул на интерстициальный фиброз почек у крыс с односторонней обструкцией мочеточника (ОНМ) и исследовать механизм его действия. Методы: 90 крыс-самцов Вистар были случайным образом разделены на 5 групп: группа мнимых операций, модельная группа, группа с чистым мочеточником (контрольная группа), группа с низкой дозой гранул отхаркивающего средства (группа с низкой дозой), группа с высокой дозой гранул отхаркивающего средства (группа с высокой дозой), по 18 крыс в каждой группе, кроме группы мнимых операций, остальные группы были использованы для создания животной модели интерстициального фиброза методом односторонней обструкции мочеточника (УОМ), и группы получали препараты соответствующей концентрации и дозы с первого дня до операции. Крыс умерщвляли партиями на 3, 7 и 14 сутки после операции, определяли изменения N-ацетил-β-глюкозаминидазы (NAG) в моче, креатинина крови (Scr) и азота мочевины (BUN), а почечные ткани на стороне инфаркта подвергали HE-окрашиванию и окрашиванию по Массону, что использовали для наблюдения за патологическими изменениями в почечных тканях и полуколичественного расчета индекса тубулоинтерстициального повреждения (TII). Окрашивание HE использовалось для наблюдения за патологическими изменениями почечной ткани и полуколичественного расчета индекса тубулоинтерстициального повреждения (TII), окрашивание Masson — для определения площади коллагена в интерстиции почек, а иммуногистохимия — для выявления экспрессии фактора роста соединительной ткани (CTGF), коллагена I типа (ColⅠ), фактора роста гепатоцитов (HGF) и костеобразующего белка (BMP)-7 в почечных тканях. Результаты: по сравнению с модельной и контрольной группами отхаркивающие гранулы значительно снижали уровень фермента NAG в моче, Scr и BUN у крыс UUO через 14 дней после операции (P<0,05); TII-шкала HE-окрашивания почечных тканей на стороне обструкции показала, что индекс повреждения почечных канальцев в 2 опытных группах был ниже, чем в модельной и контрольной группах в разные сроки (P<0,05-0,01); окрашивание по Массону для определения Площадь почечного интерстициального коллагена у крыс 2 опытной группы была меньше, чем в модельной и контрольной группах (P<0,05~0,01); метод иммуногистохимического окрашивания показал, что по сравнению с модельной и контрольной группами экспрессия CTGF и ColⅠ в почечных тканях крыс 2 опытной группы была снижена (P<0,05), а экспрессия HGF и BMP-7 в почечных тканях была повышена (P<0,05). Заключение: Отхаркивающие гранулы обладают эффектом улучшения интерстициального фиброза почек, механизм которого может быть связан с понижением регуляции экспрессии фиброгенных факторов CTGF и ColⅠ и повышением экспрессии антифиброгенных факторов HGF и BMP-7 в почках крыс UUO. Влияние гранул отхаркивающего средства на ультраструктуру ММП-2, ТИМП-2, ЭЦМ и подоцитов в почечной коре 5/6 нефрэктомированных крыс Цель: изучить влияние гранул отхаркивающего средства на матриксную металлопротеиназу-2 (ММП-2) и тканевой ингибитор металлопротеиназы-2 (ТИМП-2) в почечной коре 5/6 нефрэктомированных крыс. Исследовали влияние экспрессии белков матриксной металлопротеиназы-2 (ММП-2) и тканевого ингибитора металлопротеиназы-2 (TIMP-2), накопление внеклеточного матрикса (ВКМ) и ультраструктуру подоцитов. Методы: 55 крыс Вистар были случайным образом разделены на 10 групп нормального контроля, на оставшихся 5/6 нефрэктомии для создания животной модели хронической почечной недостаточности (ХПН), и крысы были случайным образом разделены на модельную группу, группу гранул уротоксина (так называемая контрольная группа), группу гранул элиминатора в низкой дозе (так называемая группа низкой дозы) и группу гранул элиминатора в высокой дозе (так называемая группа высокой дозы), по 10 крыс в каждой группе. Каждой группе из 10 крыс вводили препараты соответствующей концентрации и дозы, в течение экспериментального периода определяли белок мочи, функцию почек, через 12 недель после лечения наблюдали за патологическими изменениями в почках, окрашиванием PAS для оценки степени гломерулосклероза, иммуногистохимией для выявления гломерулярного коллагена типа Ⅳ (Col Ⅳ), фибронектина (FN), экспрессии белков MMP-2 и TIMP-2, ультраструктуру подоцитов наблюдали методом электронной микроскопии. Результаты: гранулы значительно снижали количество белка в моче у 5/6 нефрэктомированных крыс (P < 0,05), улучшали функцию почек и уменьшали их патологическое повреждение; окрашивание PAS показало, что отношение площади гломерулярного позитива к общей площади гломерул и индекс гломерулосклероза значительно снижались после лечения гранулами (P < 0,01); иммуногистохимия показала, что гранулы подавляли экспрессию FN и Col Ⅳ в почечной ткани (P < 0,01); иммуногистохимия показала, что гранулы подавляли экспрессию FN и Col Ⅳ в почечной ткани (P < 0,01). Иммуногистохимическое исследование показало, что гранулы отхаркивающего средства подавляли экспрессию FN и Col IV в почечных тканях (P<0,01), снижали экспрессию белка TIMP-2, повышали активность MMP-2 и снижали накопление ЭЦМ; электронная микроскопия показала, что гранулы отхаркивающего средства снижали отслойку подоцитов, ослабляли слияние выпячиваний ножек и защищали морфологию подоцитов. Заключение: регулируя экспрессию MMP-2 и TIMP-2 в коре почек 5/6 нефрэктомированных крыс, отхаркивающие гранулы могут способствовать деградации ЭЦМ, уменьшать накопление ЭЦМ, защищать подоциты и ослаблять эффект гломерулосклероза. Клиническое исследование 1, отхаркивающие частицы в лечении хронической почечной недостаточности Цель исследования: изучение клинической эффективности отхаркивающих частиц в лечении хронической почечной недостаточности (ХПН, ХПН). Методы: пациенты с ХПН с диагнозом китайской медицины "недостаточность селезенки и почек и обструкция мутной и застойной крови" были случайным образом разделены на экспериментальную и контрольную группы в соответствии с методом числовых таблиц, экспериментальная группа получала гранулы для выведения токсинов, а контрольная группа - гранулы для очищения мочи от токсинов, по 1 пакетику 3 раза в день. До и после лечения в обеих группах проводилось количественное определение белка в моче за 24 ч, N-ацил-β-глюкозаминидазы (NAG), гемоглобина (Hb), сывороточного альбумина (Alb), паратиреоидного гормона (PTH). До начала лечения в обеих группах наблюдали уровень паратиреоидного гормона (ПТГ), фибриногена (Fib), креатинина сыворотки (Scr), азота мочевины (BUN), мочевой кислоты (UA), β2-микроглобулина (β2-МГ), ретинол-связывающего белка (RBP) и других показателей. Запись наблюдений проводилась 1 раз в месяц в течение 3 месяцев. Результаты: после исключения недействительных случаев в исследуемой группе было 122 случая, в контрольной - 121 случай. После лечения количественное содержание белка в моче за 24 ч, NAG, PTH, Fib, Scr, BUN, UA, β2-MG и RBP у пациентов обеих групп снизилось по сравнению с периодом до лечения (P<0,01), а Hb, Alb и CCr увеличились по сравнению с периодом до лечения (P<0,01); по сравнению с тем же периодом после лечения улучшение указанных показателей в опытной группе было лучше, чем в контрольной (P<0,05). Улучшение симптомов китайской медицины под действием отхаркивающих гранул также было лучше, чем в контрольной группе (P<0,05). Общая эффективность экспериментальной группы была выше, чем контрольной (90,16% против 66,94%), X2=24,3, P<0,01. Заключение: гранулы отхаркивающего средства могут эффективно лечить хроническую почечную недостаточность, оказывая воздействие на улучшение функции почек, снижение белка мочи, повышение альбумина плазмы, коррекцию гиперпаратиреоза и коагуляции, а также улучшение клинических симптомов. Клиническое исследование действия отхаркивающих гранул на течение хронической почечной недостаточности Цель: наблюдение за действием отхаркивающих гранул на течение хронической почечной недостаточности (ХПН) и изучение механизма его действия. Методы: пациенты с ХПН, соответствующие диагностическим критериям ХПН, были случайным образом разделены на тестовую и контрольную группы по методу числовых таблиц, тестовая группа получала гранулы экспекторанта, а контрольная - гранулы уретана, по 1 пакетику 3 раза в день. Наблюдение за артериальным давлением, количественное определение белка в моче в течение 24 ч, альбумина плазмы (Serum albumin , Alb), гемоглобина (Hemoglobin , Hb), креатинина сыворотки (Serum creatinine , Scr), азота мочевины (BUN), мочевой кислоты (UA) у пациентов обеих групп проводилось каждые 3 месяца, и каждый пациент наблюдался более 12 месяцев. Наблюдали и сравнивали между собой наклон и коэффициент регрессии (b) в каждой группе, используя в качестве вертикальной координаты обратный показатель креатинина крови (1/SCr), а в качестве горизонтальной - продолжительность заболевания (месяцы), а также анализировали влияние на течение заболевания изменений артериального давления, количественного содержания белка в моче за 24 часа, альбумина и гемоглобина плазмы. Результаты: в экспериментальной группе было 77 случаев и 75 случаев в контрольной группе с завершенными случаями заболевания, время наблюдения в экспериментальной группе было больше, чем в контрольной (42,8±18,5 мес. против 34,2±12,7 мес.), P<0,01; 35 случаев или 45,45% в экспериментальной группе не достигли конечной точки наблюдения в 48 месяцев, а в контрольной группе 24 случая или 32%, и частота недостижения конечной точки наблюдения в экспериментальной группе снизилась на 13,45% по сравнению с контрольной группой, P<0,01. 0,01. Была построена линия регрессии по обратной величине креатинина крови (1/Scr) и времени, при этом b-значение экспериментальной группы составило -0,00258±0,00132, а b-значение контрольной группы - -0,00386±0,00167, а наклон экспериментальной группы был достоверно меньше, чем контрольной (P<0,01). После лечения артериальное давление и количественное содержание белка в 24-часовой моче в опытной группе были ниже, чем в контрольной (P<0,05), а альбумин плазмы - выше, чем в контрольной (P<0,05). Заключение: гранулы экспекторанта могут задерживать течение КРР, и механизм этого может быть связан с такими факторами, как снижение артериального давления, уменьшение экскреции белка с мочой и повышение уровня альбумина в плазме крови.