Оплодотворение человека представляет собой сложную серию процессов, в ходе которых сперматозоид попадает в яйцеклетку, головка сперматозоида деполимеризуется, образуя мужские пронуклеусы (малепронуклеусы), а яйцеклетка активируется и претерпевает ряд трансформаций, образуя женские пронуклеусы (самки). Образование женских пронуклеусов обычно происходит синхронно, и мужские и женские пронуклеусы можно наблюдать уже через 6-20 часов после осеменения, т.е. через 2PN, после чего мужские и женские пронуклеусы приближаются друг к другу, сливаются, пронуклеусы исчезают, и оплодотворение завершается. Поэтому наблюдение двойного протопласта указывает на успешное оплодотворение, а слияние мужского и женского протопластов является признаком того, что оплодотворение завершено. В клинической практике, из-за рабочего времени и условий, в которых культивируются эмбрионы, большинство центров репродукции наблюдают протопласт только через 16-20 часов после оплодотворения. Если прокариотическое ядро не наблюдается, т.е. 0PN, 0PN может существовать в следующих ситуациях: 1. Медленное развитие прокариотического ядра, задержка оплодотворения и отсутствие формирования прокариотического ядра в течение времени наблюдения. 2. развитие ядра-предшественника происходит слишком быстро, и яйцеклетка завершает оплодотворение, а ядро-предшественник сливается и растворяется в течение времени наблюдения. В обоих этих случаях яйцеклетка действительно успешно оплодотворяется, и в конечном итоге может быть получен нормальный эмбрион. 3. яйцеклетки не оплодотворяются. Некоторые 0PN могут развивать стадии оогенеза и бластоцисты, а их морфология и скорость эмбрионального развития сходны с таковыми у нормально оплодотворенных 2PN, но нет уверенности, что они происходят от нормального оплодотворения. Рисунок 1 2PN Рисунок 2 0PN В клинической работе для переноса предпочтительны эмбрионы, полученные из 2PN, но бывают случаи, особенно у пожилых пациентов с пониженной функцией яичников, когда достаточное количество эмбрионов, полученных из 2PN, недоступно, поэтому можно ли переносить эмбрионы, полученные из 0PN, и безопасно ли это? Для изучения ценности эмбрионов, полученных из 0PN, Минг Ли и др. сравнили результаты беременности эмбрионов 0PN на стадии оогенеза, эмбрионов 0PN на стадии бластоцисты и соответствующих эмбрионов 2PN. Всего было идентифицировано 368 эмбрионов 0PN на стадии оогенеза/бластоцисты. Было установлено, что частота беременности эмбрионов 0PN на стадии оогенеза была значительно ниже, чем у эмбрионов 2PN (свежий цикл: 8,04% против 19,50%, замороженный цикл: 15,38% против 28,24%, P<0,05), в то время как частота беременности эмбрионов 0PN на стадии бластоцисты была такой же, как у 2PN (39,56% против 48,18%, P>0,05). Исследование показало, что развитие эмбрионов от оогенеза до стадии бластоцисты также является процессом отбора и элиминации, когда сам эмбрион имеет проблемы, то ему трудно развиваться дальше в бластоцисту, а продление времени культуры in vitro может постепенно отсеять недиплоидные эмбрионы и увеличить долю нормальных эмбрионов. В конечном итоге, в общей сложности 44 эмбриона, полученных в ходе исследования с помощью 0PN, родились, все они были здоровы, и эмбрионы 0PN были признаны безопасными. В других исследованиях, Манор, Малков и др. проанализировали эмбрионы 0PN и обнаружили, что некоторые из эмбрионов 0PN были нормальными диплоидами и считались безопасными для переноса эмбрионов. Тем не менее, существует относительно мало исследований эмбрионов 0PN, и безопасность эмбрионов, полученных из 0PN, для переноса все еще требует больших выборок и длительного наблюдения. В настоящее время оогенные эмбрионы, полученные из 0PN, в нашем центре не будут переноситься и будут продолжать культивироваться in vitro до стадии бластоцисты перед криоконсервацией. При отсутствии эмбрионов 2PN, эмбрионы 0PN могут быть перенесены с полного информированного согласия пациента. Кроме того, появившаяся в последние годы техника наблюдения за эмбрионами в режиме time-lapse позволяет динамично наблюдать за развитием эмбриона с короткими и фиксированными интервалами получения изображений (обычно 5-20 мин), что позволяет динамично наблюдать за морфологией эмбриона, одновременно предоставляя информацию о времени изменений в морфологии эмбриона и обеспечивая стабильную среду развития эмбриона в процессе наблюдения, и может Это дает ключ к разгадке происхождения эмбрионов 0PN. В настоящее время эта технология доступна в нашем центре.