Экстракорпоральное оплодотворение и перенос эмбрионов — это метод вспомогательной репродукции, который часто называют «ЭКО». ЭКО предполагает извлечение яйцеклетки и сперматозоида, их оплодотворение in vitro и выращивание эмбриона, который затем имплантируется обратно в тело матери. Весь процесс длится всего 2-6 дней в пробирке. Благодаря стремительному развитию репродуктивных технологий, таких как создание новых игл для определения овуляции, усовершенствованные методы суперовуляции, использование трансвагинального ультразвука для извлечения яйцеклеток, крупные прорывы в технике оплодотворения in vitro, усовершенствование методов культивирования in vitro и изменения в методах имплантации эмбрионов, технология становится все более совершенной, что делает ЭКО одной из самых популярных форм вспомогательной фертильности для всех бесплодных пар.
Интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида
Интрацитоплазматическая инъекция одного сперматозоида — это особая форма оплодотворения, которая сопровождает ЭКО и предполагает введение одного сперматозоида непосредственно в яйцеклетку для содействия оплодотворению. Для тех, кому требуется эта техника, повышается частота наступления беременности.
Показания к применению включают.
① Те, кому требуется извлечение спермы через яички или придаток, а также мужчины с тяжелой олигоспермией обычно нуждаются в ИКСИ для оплодотворения;
(ii) ИКСИ может потребоваться тем, у кого ранее не получилось оплодотворение при обычном ЭКО (не абсолютное);
(iii) ИКСИ может также рассматриваться для пар с необъяснимым бесплодием;
(iv) те, у кого в прошлом наблюдалось аномальное оплодотворение, например, оплодотворение несколькими сперматозоидами [1].
Методы преимплантационной генетической диагностики эмбрионов
Преимплантационная генетическая диагностика — это метод ранней пренатальной диагностики, который анализирует генетический материал гамет или эмбрионов до имплантации эмбриона, чтобы определить, имеют ли гаметы или эмбрионы аномальный генетический материал; с помощью ПГД эмбрионы с нормальными показателями отбираются для переноса.
Показания к применению включают.
① Генетические нарушения, сцепленные с полом;
(ii) Генетические заболевания, связанные с одним геном;
(iii) Хромосомные нарушения[2];
④ Аномалии числа и структуры хромосом;
⑤ Люди с высоким риском рождения ребенка с отклонениями.
I. Замораживание эмбрионов и перенос эмбрионов методом замораживания-размораживания
Замораживание лишних эмбрионов для последующего переноса может повысить суммарный процент наступления беременности при ЭКО и привести к значительной экономии средств. Иногда все эмбрионы замораживаются, если существует серьезный риск OHSS, или когда перенос эмбрионов нецелесообразен по другим причинам. Поэтому замораживание и размораживание эмбрионов стало неотъемлемой частью процедуры ЭКО.
II. Процедура переноса эмбрионов методом замораживания и оттаивания обычно выглядит следующим образом.
Для женщин с регулярными менструациями перенос может быть осуществлен после овуляции, в зависимости от того, переносятся ли эмбрионы через 3 или 5 дней после овуляции в зависимости от стадии, на которой они находятся в момент заморозки (оогенез или бластоциста).
Для женщин с нерегулярными месячными можно использовать искусственный цикл для наращивания эндометрия. Обычно это делается путем начала приема 4-6 мг эстрадиола валерата перорально ежедневно на 2-й день менструации (или кровотечения при отмене прогестерона), контроля состояния эндометрия через 8-10 дней и начала приема прогестерона, когда толщина эндометрия составит ≥8 мм, с переносом эмбрионов через 4-5 дней. В случае переноса бластоцисты время переноса откладывается.
Размораживание и перенос эмбрионов
Эмбрионы размораживаются и замораживаются в день переноса эмбрионов, а процедура переноса не отличается от процедуры переноса свежих эмбрионов[3].
IV. Лютеиновая поддержка в циклах переноса замороженных оттаявших эмбрионов
Лютеиновая поддержка очень важна для женщин, использующих метод искусственного цикла для формирования эндометрия, поскольку у таких женщин нет фолликулярного роста, не формируется лютеиновый корпус и отсутствует собственная секреция прогестерона во время искусственного цикла, и поэтому они должны полагаться на экзогенный прогестерон для поддержания нормального развития эндометрия и имплантации эмбриона.
Необходима ли лютеиновая поддержка женщинам, перенесшим эмбрионы в естественном цикле? В некоторых литературных источниках сообщается об отсутствии разницы в частоте наступления беременности с применением или без применения лютеиновой поддержки в таких условиях, поэтому она не считается необходимой для этих лиц.
Вылупление с помощью эмбрионов
Оплодотворенная яйцеклетка человека на раннем этапе заключена в зону пеллюцида, из которой должен вылупиться эмбрион, прежде чем его можно будет имплантировать. Если zona pellucida слишком твердая, слишком толстая или иным образом препятствует лизису zona pellucida, это может помешать эмбриону вылупиться, что приведет к неудачной имплантации.
Конкретные методы эмбрио-ассистированного хетчинга включают.
(i) разрезание zona pellucida;
Лазерная перфорация: лазер используется для создания отверстия в zona pellucida или для истончения zona pellucida.
Зона пеллюцида имеет тенденцию к затвердеванию у пожилых женщин. Для женщин в возрасте ≥38 лет с толстой zona pellucida и неоднократными неудачами ЭКО может быть рассмотрен вопрос об использовании хетчинга с эмбриологической поддержкой для улучшения показателей оплодотворения эмбрионов.
Техника ЭКО Культура бластоцисты
В ЭКО бластоциста является последней стадией культивирования эмбриона in vitro и обычно образуется на 5-7 день после оплодотворения яйцеклетки. В естественном состоянии человеческий эмбрион имплантируется матери в виде бластоцисты. Поэтому нетрудно понять, что перенос бластоцисты проводится для получения высокой частоты имплантации эмбриона.
I. Преимущества культуры бластоцисты и переноса бластоцисты
Если эмбрион не имеет потенциала развития или несет аномальные хромосомы и гены, он может быть удален естественным путем из-за собственных аномалий развития в процессе длительного культивирования, и только эмбрионы лучшего качества могут развиться в бластоцисты.
2. развитие плода более синхронизировано с эндометрием: перенос на стадии бластоцисты обеспечивает естественную среду, более близкую к репродуктивной физиологии, и имеет более высокую способность к имплантации.
3. меньший риск многоплодной беременности: из-за высокой частоты имплантации при переносе бластоцисты количество переносимых эмбрионов может быть уменьшено. В случае бластоцисты высокого качества рекомендуется перенос одной бластоцисты, что может привести к низкой частоте многоплодной беременности.
4. культура бластоцисты обеспечивает достаточное время для биопсии эмбрионов с расщепленной стадией для преимплантационной генетической диагностики (ПГД).
2. Недостатки культуры бластоцисты
1. Неудача при культивировании эмбрионов: для культивирования бластоцисты требуются высокие условия, и из-за лабораторных условий культивирования или самих эмбрионов, эмбрионы могут перестать развиваться или дегенерировать, что приведет к отсутствию эмбрионов, доступных для переноса.
2. больше эмбрионов на стадии оогенеза может быть потрачено впустую: поскольку среда культуры in vitro не является естественной средой in vivo, продление времени культивирования может привести к деградации некоторых эмбрионов на стадии оогенеза, способных к имплантации.
Подходящие группы для культуры бластоцист
1. пациентки, потерпевшие неудачу при проведении ЭКО;
2. пациентки с большим количеством плодов: поскольку бластоцисты имеют высокий процент имплантации, они могут сэкономить время и силы, позволяя забеременеть на ранних сроках;
3. Когда развитие эндометрия и эмбриона не синхронизированы: в цикле переноса свежих эмбрионов, когда прогестерон значительно повышен перед извлечением яйцеклетки, развитие эндометрия не синхронизировано с развитием эмбриона, а перенос бластоцисты может исправить эту асинхронность и улучшить исход беременности;
4. пациенты, прошедшие преимплантационную генетическую диагностику.
Подходящие группы
1. пациентки с непроходимостью труб;
2. пациенты с необъяснимым бесплодием, которым не удалось зачать ребенка с помощью ВМС и других методов лечения;
3. пациенты с тяжелой олигоспермией у партнера-мужчины или азооспермией у партнера-мужчины, которым необходимо получить сперму с помощью пункции яичка или эпидидимальной пункции;
4. Женщины с эндометриозом и бесплодием могут использовать ЭКО, чтобы помочь им зачать ребенка, если это целесообразно;
5. пациентки с нарушениями овуляции, у которых нет зрелых фолликулов после общей терапии овуляции.