Этапы ЭКО несколько различаются в зависимости от конкретных обстоятельств пациента. Это может быть простое экстракорпоральное оплодотворение и перенос эмбриона, а может быть экстракорпоральное оплодотворение плюс другие вспомогательные репродуктивные технологии, такие как микроскопическая инсеминация, вспомогательный хетчинг, хирургические методы извлечения спермы, созревание яйцеклеток in vitro, замораживание яйцеклеток/сперматозоидов/эмбрионов и преимплантационная диагностика. Основными этапами ЭКО являются: производство нескольких яйцеклеток женщиной, извлечение яйцеклеток из яичников и спермы у мужчины, оплодотворение спермы и яйцеклеток в лаборатории ЭКО, культивирование оплодотворенных яйцеклеток in vitro с целью отбора хороших эмбрионов для переноса, перенос эмбрионов в матку пациентки, поддержка беременности после переноса эмбрионов, тесты на беременность после переноса эмбрионов, дни плода после беременности и определение имплантации эмбрионов. Процедура основана на следующих принципах ЭКО включает в себя следующие этапы и процедуры: (1) Обработка перед оплодотворением и мониторинг овуляции: Для того чтобы собрать зрелые или почти зрелые ооциты из яичников в нужное время, чрезвычайно важно точно отслеживать ход созревания фолликулов до овуляции. Часто при использовании естественного менструального цикла для сбора яйцеклеток можно извлечь только одну яйцеклетку. Чтобы повысить шансы на успех и увеличить количество развивающихся фолликулов для получения нескольких яйцеклеток, в настоящее время обычно используются стимулированные циклы (также известные как суперовуляция) для получения более трех ооцитов за один раз. ① Преовуляторный мониторинг во время естественного менструального цикла: первый в мире успешный случай ЭКО был достигнут с помощью мониторинга естественного цикла на предмет овуляции. День овуляции определяется с помощью базальной температуры тела, эндокринных измерений (показатели эстрадиола в крови, лютеинизирующего гормона в моче) и ультразвукового мониторинга, а также клинических наблюдений (изменения цервикальной слизи и т.д.). (ii) Ультразвуковой мониторинг: он должен быть тесно скоординирован с эндокринными измерениями. (iii) Стимулирование овуляции: в настоящее время существует четыре основные схемы стимулирования овуляции: кломифен-человеческий постменопаузальный гонадотропин (ЧМГ)-хорионический гонадотропин (ХГЧ); ЧМГ-ХГЧ; фолликулостимулирующий гормон (ФСГ)-ХГЧ; гонадотропин Обычно используется схема кломифен-ХМГ-ХГЧ. (2) Сбор яиц: собирайте яйца в определенное время. Существуют следующие методы сбора яйцеклеток: (1) прямая визуальная аспирация фолликулов при кесаревом сечении. (2) Транслапароскопическое извлечение яйцеклеток. (3) Трансабдоминальная пункция стенки брюшной полости, мочевого пузыря или влагалища под контролем УЗИ. В настоящее время чаще всего используется транслапароскопическое или трансвагинальное извлечение яйцеклеток под контролем ультразвука, причем последнее особенно удобно. (3) Культура ооцитов: сразу после аспирации фолликулярной жидкости производится поиск яйцеклеток. После извлечения ооцитов их помещают в культуральную посуду, содержащую искусственную культуральную жидкость и определенное количество фолликулярной жидкости, чтобы помочь росту и развитию ооцитов. Время инкубации зависит от зрелости взятых фолликулов, зрелые фолликулы обычно инкубируются в течение 2-6 часов. (4) Экстракорпоральное оплодотворение: сперма собирается и промывается, чтобы ее можно было использовать in vitro, затем помещается в культуральную среду, содержащую ооциты, и инкубируется в течение 15-24 часов. Когда оплодотворенная яйцеклетка под микроскопом разделится на 4-8 клеток, ее можно рассматривать для переноса эмбрионов. (5) Перенос эмбрионов: влагалище и шейка матки очищаются физраствором, затем протираются культуральной жидкостью, и в цервикальный канал помещается металлический или пластиковый катетер. Другой ассистент использует 1,3-миллиметровую трубку из ПТФЭ для аспирации клеток эмбриона из культуральной жидкости под микроскопом плюс 0,03~0,05 мл культуральной жидкости или 0,03~0,05 мл сыворотки испытуемого. После переноса эмбриона его помещают в постель на 24 часа, ограничивают активность на 3-4 дня и назначают прогестерон. Через 2 недели после переноса проводится измерение бета-ГСПГ, и при отсутствии беременности прекращается прием прогестерона. Беременности с успешным переносом наблюдаются как беременности высокого риска.