I. Морфология вируса гепатита В.
В сыворотке инфицированных вирусом гепатита В людей присутствуют три формы вирусных частиц.
1, крупные сферические частицы, частицы Дейна, состоящие из оболочки и ядра, оболочка содержит HBsAg, клеточные липиды гликопротеинового уровня, а ядро содержит основной антиген HBcAg, циклическую двухцепочечную ДНК и ДНК-полимеразу.
2, мелкие сферические частицы.
3.Тубулярные частицы. Маленькие сферические гранулы и трубчатые гранулы состоят из HBsAg без нуклеиновой кислоты и не являются инфекционными. Цзан Вэй, отделение гепатита, Вэйхайская инфекционная больница
Структура частиц вируса гепатита В
Внешняя мембрана: несет HBsAg
Ядро: носитель HBcAg
Ядро: двухцепочечные молекулы ДНК, ДНК-полимераза.
Примечание: HBeAg не входит в состав частиц.
Разница между серотипами и генотипами ВГВ.
Серотип определяется аминокислотными остатками белка наружной мембраны вируса, поверхностного антигена, и экспрессией белка наружной мембраны вируса. общий кластер антигенных детерминант a и две детерминанты подтипов d/y и w/r на HBsAg делят HBV на четыре серотипа: ayw adw ayr adr. w также делится на w1/w2/w3/w4. q делится на q+ и q-, что позволяет разделить его на девять серотипов. ayw1/ayw2/ayw3/ayw4/ayr/adw2/adw4/adrq+/adrq-/ Хотя методы серотипирования были разработаны в течение многих лет, они не имеют большого клинического значения.
Генетическая субтипизация — это генетическая классификация, основанная на геномных сравнениях, а вариабельность нуклеотидных последовательностей ≥8% между штаммами считается разными генотипами. Было выделено восемь генетических подтипов, A-H.
II. Процесс репликации вируса гепатита В в гепатоцитах
1. После попадания HBV в организм, HBsAg проникает в гепатоцит хозяина, прилипая к рецепторам на поверхности клеток печени восприимчивого человека, и тот высвобождает вирусное ядро в цитоплазму.
2, В цитоплазме, HBV-ДНК в расслабленной циркулярной ДНК, в ядро. В собственной ДНК, направленной действием ДНК-полимеразы на удлинение положительной нити, и разрыв положительной нити закрывается, образуется ккДНК.
3. процесс транскрипции: кцДНК используется в качестве шаблона для транскрипции промежуточной, прегеномной РНК (HBV-мРНК). Существует четыре типа HBV-мРНК, включая 3,5 кб РНК и три типа субгеномной мРНК. Первая используется для вирусной репликации и содержит всю генетическую информацию в последовательности ДНК вируса, а вторая используется для синтеза вирусных белков (включая HBsAg, HBcAg/HBeAg, P белок, X белок и т.д.).
4. Процесс обратной транскрипции: прегеномная РНК транслоцируется в цитоплазму, где 3,5 кб РНК заворачивается в белок нуклеокапсида вместе с белком P, образуя вирусное ядро. Затем она подвергается обратной транскрипции в негативно-цепочечную ДНК. По мере расширения негативно-цепочечной ДНК происходит деградация прегеномной РНК и синтез позитивно-цепочечной ДНК после полного синтеза негативно-цепочечной ДНК.
5. вновь синтезированная двухцепочечная ДНК мигрирует в цитоплазматический ретикулум и инкапсулируется HBsAg, образуя инфекционную виросому HBV, которая высвобождается вне клетки. Примечание: Часть вновь синтезированной вирусной коры остается в клетке и попадает в ядро для пополнения пула ккДНК, обеспечивая стабильное количество ккДНК в ядре гепатоцита.
Контактные клинические точки.
1. нуклеозидные аналоги действуют на процесс РНК → двухцепочечная ДНК, т.е. обратную транскрипцию. Обратная транскрипция происходит внутри вирусного нуклеокапсида, а обратная транскриптаза, ДНК-полимераза ВГВ, в организме человека отсутствует. Поэтому нуклеозидные аналоги, действующие на обратную транскриптазу, не токсичны для ядра человека, но могут быть митохондриальными. Механизм следующий.
Митохондрии являются полуавтономными органеллами, которые способны полагаться на ядерную ДНК для репликации, транскрипции и трансляции, но они имеют свою собственную систему синтеза белка и могут самосинтезировать с помощью собственной ДНК-полимеразы. ДНК-полимераза γ является единственной полимеразой, присутствующей в митохондриях, которая участвует в митохондриальной репликации и поэтому также известна как полимераза γ митохондриальной ДНК (мтДНК). Аналоги нуклеозидов (кислот) могут оказывать некоторое влияние на Аналоги нуклеозидов (кислот) могут оказывать ингибирующее действие на мтДНК-полимеразу γ, что приводит к снижению содержания мтДНК или даже ее истощению в поврежденных клетках, влияя на функцию окислительного фосфорилирования митохондрий, что приводит к снижению выработки АТФ и клеточной дисфункции.
2. Механизм действия нуклеозидных аналогов: конкурентное ингибирование ферментов.