Мутации в гене MMR нарушают функцию белка MMR, вызывая образование повторяющихся последовательностей ДНК и ошибки репарации ДНК, что приводит к микросателлитной нестабильности (MSI) в ДНК пациента. Синдром Линча — это аутосомно-доминантное заболевание, вызванное зародышевыми мутациями в гене репарации несоответствия (MMR). Анализ на MSI имеет важное клиническое значение: 1) диагностика синдрома Линча: MSI является важным биологическим маркером синдрома Линча, и диагноз устанавливается при подтверждении MSI-H; 2) определение прогноза и результатов лечения: больные колоректальным раком с MSI-H плохо реагируют на химиотерапевтический препарат 5-фторурацил; 3) дифференциация между наследственным герминальным происхождением и спорадическим происхождением MSI толстой кишки. Если опухоль положительна на метилирование промотора гена MMR или мутацию гена BRAF, это указывает на спорадический рак; 4. Скрининг: пересмотренные рекомендации Bethesda рекомендуют рутинный скрининг на MSI у пациентов моложе 50 лет для рутинного тестирования на MSI. Согласно Bethesda revised guidelines, тестирование на MSI необходимо пациентам со следующими показаниями: 1) пациент моложе 50 лет; 2) опухоль расположена в правой гемиколэктомии; 3) предрасположенность к множественным опухолям в кишечнике или других органах вне кишечника; 4) предрасположенность к рецидивам других первичных злокачественных опухолей после операции; 5) лимфоцитарная инфильтрация опухоли; 6) множественное выделение муцина или наличие импринтированных клеток; 7) инфильтративный характер роста. В настоящее время для обнаружения MSI используются следующие два метода: 1. Метод обнаружения с помощью технологии ПЦР Парафиновые срезы подвергаются ручной микродиссекции для выделения ДНК, некоторые микросателлитные пятна используются в качестве маркеров для синтеза праймеров для ПЦР, а спектр MSI получается с помощью гель-электрофореза для сравнительного анализа. Две наиболее часто используемые системы анализа Promega состоят из 5 однонуклеотидных маркерных участков (BAT-25, -26, MONO-27, NR-21, -24); в то время как референсная система Национального института рака (NCI) состоит из 3 динуклеотидов (D2S123, D5S346 и D17S250) и 2 однонуклеотидов (BAT-25 и -26). . Диагноз MSI может быть установлен при изменении длины микросателлита в профиле зародышевой линии. Анализ микросателлитных данных может привести к трем исходам: высокая микросателлитная нестабильность (MSI-H), низкая микросателлитная нестабильность (MSI-L) и микросателлитная стабильность (MSS). 2. Иммуногистохимический (ИГХ) анализ Основные гены ДНК MMR включают MLH1, MSH2, MSH6, PMS2 и PMS1. Методы ИГХ обычно выявляют четыре гена MLH1, MSH2, MSH6 и PMS2. По сравнению с методами ПЦР, анализ ICH является более удобным и дешевым. Кроме того, ICH-анализ может непосредственно обнаружить гены, которые, скорее всего, мутировали. В гетеродимерной паре белков MMR необходимыми димерами являются MLH1 и MSH2. Примечание: *Недостаток экспрессии MSH2 и MSH6 обычно обусловлен мутациями зародышевой линии MSH2, хотя он также может быть вызван транскрипционной трансляцией соседнего гена EPCAM, который способен инактивировать ген MSH2. #MLH1 может быть инактивирован зародышевыми мутациями или высоким метилированием промотора MLH1, что обычно сопровождается соматической мутацией BRAF V600E. Сокращения: +, экспрессия; -, делеция; В настоящее время MSI-тестирование колоректальных раков с клиникопатологическими особенностями может уменьшить клиническую недодиагностику синдрома Линча, а MSI-тестирование важно для окончательной диагностики, руководства клинической прогностической оценкой, медикаментозного лечения и последующего наблюдения, поэтому мы должны хорошо использовать MSI-тестирование как инструмент.